尼康對(duì)焦系統(tǒng)，更進(jìn)一步！
倒置研究級(jí)顯微鏡及其相關(guān)附屬設(shè)備在為生命科學(xué)的進(jìn)步貢獻(xiàn)著一份力量。焦點(diǎn)漂移的問(wèn)題，尤其是使用高倍數(shù)高分辨率長(zhǎng)時(shí)間序列成像時(shí)，會(huì)降低圖像采集的穩(wěn)定性。尼康對(duì)焦系統(tǒng)正是解決這一問(wèn)題的革命性變革。新一代對(duì)焦系統(tǒng)（Perfect Focus System，PFS）進(jìn)一步使變革更為深入，將維持焦點(diǎn)精確度與毫秒水平的校正水平提升到了一個(gè)新的高度。
全新第三代尼康對(duì)焦系統(tǒng)（PFS3）分為兩個(gè)型號(hào)。普通型可用于紫外波段的成像，紅外型可用于多光子成像。
第三代PFS3相對(duì)前一代產(chǎn)品具有顯著的提高：
● 對(duì)焦深度更深 ● 兼容塑料培養(yǎng)皿與多孔板
● 激發(fā)光適用范圍更廣 ● 纖薄設(shè)計(jì)
的尼康對(duì)焦技術(shù)
尼康Eclipse Ti-E倒置顯微鏡配置對(duì)焦系統(tǒng)可以對(duì)活細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間時(shí)間序列成像中由于溫度變化或者機(jī)械振動(dòng)而引起的焦點(diǎn)漂移進(jìn)行校正。
結(jié)合高靈敏度反饋系統(tǒng)與Ti-E高精度的Z軸控制，而輕松實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)焦點(diǎn)校正，可實(shí)現(xiàn)毫秒級(jí)的高速矯正。
PFS3包含的光學(xué)偏移技術(shù)，這一技術(shù)使您可以在蓋玻片上方聚焦的同時(shí)進(jìn)行蓋玻片交界面的跟蹤。同時(shí)這一技術(shù)使實(shí)時(shí)的焦點(diǎn)校正成為可能，并使校正速度顯著提高，相對(duì)于其他廠家的同類產(chǎn)品具有更高的穩(wěn)定性不容易發(fā)生校正錯(cuò)誤。因?yàn)槠渌到y(tǒng)需要在觀察焦點(diǎn)與蓋玻片交界面間往復(fù)切換。
使用紅外光檢測(cè)焦點(diǎn)
PFS3使用870nm紅外LED燈與內(nèi)置的線狀CMOS探測(cè)器而實(shí)現(xiàn)焦點(diǎn)的檢測(cè)，870nm紅外光的使用并不會(huì)干擾熒光觀察。這意味著觀察與焦點(diǎn)校正可以同時(shí)進(jìn)行，而不會(huì)對(duì)拍攝的照片有任何影響。
同時(shí)由于LED所使用的波長(zhǎng)不會(huì)影響成像質(zhì)量，所以即使是進(jìn)行單分子高對(duì)比度的熒光觀察使用具有高信噪比的顯微鏡也可以同時(shí)對(duì)焦點(diǎn)進(jìn)行校正。
比以往任何時(shí)候更強(qiáng)大更通用
自2005年引入以來(lái)，尼康對(duì)焦系統(tǒng)已成為活細(xì)胞成像系統(tǒng)的標(biāo)準(zhǔn)之一。全新第三代系統(tǒng)提供兩種型號(hào)，具備多項(xiàng)功能性提升。
● 對(duì)焦深度更深-PFS3可對(duì)離物鏡更遠(yuǎn)觀察樣品更深的部位進(jìn)行縱向漂移的校正。這一進(jìn)步不止是對(duì)于發(fā)育生物學(xué)的研究，而且是對(duì)于厚組織與完整動(dòng)物中細(xì)胞動(dòng)態(tài)的研究都可以提供極大的幫助。
● 更寬廣的光譜適用性是多光子顯微鏡與光捕獲實(shí)驗(yàn)成為可能---多光子型對(duì)焦系統(tǒng)可使用880-1300nm的紅外光作為激發(fā)光不知可使其用于多光子顯微鏡而且是其他如光捕獲，光捏等實(shí)用紅外激光的實(shí)驗(yàn)成為可能。
●兼容塑料培養(yǎng)皿與多孔板---塑料培養(yǎng)皿比玻璃底培養(yǎng)皿具有更低的價(jià)格并適合與細(xì)胞的培養(yǎng)?，F(xiàn)在PFS3可以很好的適用于這一類器皿。您可以顯著的降低耗材的支出，尤其是對(duì)于高通量的篩選試驗(yàn)?zāi)€可以適用各種規(guī)格的多孔板。
●纖薄設(shè)計(jì)---全新設(shè)計(jì)的PFS系統(tǒng)使您可以更輕松的接觸物鏡并調(diào)節(jié)校正環(huán)。此外，所有的對(duì)焦功能您都可以通過(guò)計(jì)算機(jī)或者外部控制器控制。PFS3沒(méi)有任何的手動(dòng)部件，您無(wú)需打開(kāi)屏蔽罩，這可使您的實(shí)驗(yàn)在不被干擾的情況下進(jìn)行。
各種觀察方式與應(yīng)用的理想選擇
尼康對(duì)焦系統(tǒng)是多種應(yīng)用的理想選擇，適用于明場(chǎng)，相差，DIC，共聚焦，多光子，超分辨等各種觀察方式，這其中也包括TIRF實(shí)驗(yàn)。在TIRF顯微鏡中激光通過(guò)樣品與蓋玻片的交界面發(fā)生全反射現(xiàn)象，通過(guò)誘發(fā)的漸釋波僅誘發(fā)約50nm以內(nèi)的熒光物質(zhì)。因此長(zhǎng)時(shí)間的TIRF成像對(duì)焦點(diǎn)的要求極其敏感。
此外，許多活細(xì)胞成像實(shí)驗(yàn)過(guò)程中都需要更換溶液或滴加藥物。如圖中所示，沒(méi)有使用對(duì)焦系統(tǒng)的情況下添加藥物焦點(diǎn)很快發(fā)生了漂移，而同時(shí)開(kāi)啟對(duì)焦系統(tǒng)的情況下焦點(diǎn)則紋絲未動(dòng)。
對(duì)焦系統(tǒng)對(duì)于多點(diǎn)成像也可以提供極大幫助，出圖中DIC的圖像PFS可以輕松校正由于XY位點(diǎn)不同而產(chǎn)生的焦點(diǎn)差異。您無(wú)需再進(jìn)行惱人的自動(dòng)對(duì)焦功能即可輕松快速的實(shí)現(xiàn)真正超快速的6D多點(diǎn)拍攝，即使是進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間的觀察您也不用擔(dān)心。
第三代對(duì)焦系統(tǒng)具備更深的焦點(diǎn)校正能力，可對(duì)發(fā)育生物學(xué)或厚組織及完整動(dòng)物中細(xì)胞動(dòng)態(tài)的觀察提供極大的幫助。
