人外周血淋巴細(xì)胞分離液
別名
人淋巴細(xì)胞分離液
英文名稱 Lymphocyte Separation Medium (Human)
規(guī)格 200ml ; 20*200ml
儲(chǔ)存條件 RT，避光
有效期 2年
單位 瓶

人外周血淋巴細(xì)胞分離液產(chǎn)品簡(jiǎn)介： 

      本產(chǎn)品是一種用于分離人外周血淋巴細(xì)胞的無(wú)菌、低內(nèi)毒素水平的密度梯度分離液。其分離原理是根據(jù)血細(xì)胞的密度差異（紅細(xì)胞和粒細(xì)胞密度為1.090 g/mL左右；淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞密度為1.075~1.090 g/mL；血小板為1.030~1.035 g/mL），通過(guò)離心使一定密度的細(xì)胞按相應(yīng)密度梯度分布，從而將淋巴細(xì)胞從人外周血或臍帶血中分離出來(lái)。

人外周血淋巴細(xì)胞分離液產(chǎn)品指標(biāo)： 

密度                  1.077±0.001g/mL 

滲透壓               290~350 mOsm/kg H2O 

無(wú)菌                  0.1μm 濾膜過(guò)濾

保存條件：本產(chǎn)品對(duì)光敏感，應(yīng)該室溫避光儲(chǔ)存，保質(zhì)期 2 年。無(wú)菌開(kāi)封后，保存于室溫。

操作步驟（僅供參考）： 

1. 取新鮮抗凝全血（EDTA、枸*酸鈉或肝素抗凝均可）或者去纖維蛋白血液，用等體積的全血及組織稀釋液或者PBS稀釋全血。 

2. 在離心管中加入適量分離液（當(dāng)稀釋后血液體積小于3mL時(shí)，加入3mL分離液；大于等于3mL，加入等體積分離液。但二者的總體積不能超過(guò)離心管的三分之二，否則會(huì)影響分離效果），將稀釋后的血液平鋪到分離液液面上方，注意保持兩液面界面清晰。（可以使用巴氏德吸管吸取血液，然后將血液小心的平鋪于分離液上，因?yàn)閮烧叩拿芏炔町?，將形成明顯的分層界面。如果樣品較多加樣時(shí)間較長(zhǎng)，在離心之前出現(xiàn)紅細(xì)胞成團(tuán)下沉屬正常現(xiàn)象。） 

3. 室 溫 ， 水 平 轉(zhuǎn) 子 400~1000g ， 離 心20~40min（血液的體積越大所需的離心力越大，離心時(shí)間越長(zhǎng)，最佳的分離條件需摸索，離心轉(zhuǎn)速最大不超過(guò)1200g）。 

4. 離心后將出現(xiàn)明顯的分層：最上層是稀釋的血漿層，中間是透明的分離液層，血漿與分離液之間的白膜層即為淋巴細(xì)胞層，離心管底部是紅細(xì)胞與粒細(xì)胞。

5. 小心的吸取白膜層細(xì)胞到15mL潔凈的離心管中， 10mL PBS或細(xì)胞洗滌液洗滌白膜層細(xì)胞。250g，離心10min。

6. 棄上清，5mL的PBS或細(xì)胞清洗液重懸細(xì)胞，250g，離心10min。

7. 重復(fù)步驟6

8. 棄上清，細(xì)胞重懸備用。