FluorCam開放式葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)
FluorCam開放式葉綠素?zé)晒獬上裣到y(tǒng)是一款高度靈活、應(yīng)用廣泛的植物生理生態(tài)研究?jī)x器,系統(tǒng)采用模塊化結(jié)構(gòu),有四個(gè)LEDs光源版、CCD鏡頭、支架、控制單元及FluorCam成像分析軟件等組成。兩對(duì)LEDs光源版提供測(cè)量光、光化學(xué)光和飽和光閃,角度和高度可調(diào);CCD鏡頭高度可調(diào),且可靈活配置PSI特制高靈敏度CCD鏡頭或高分辨率鏡頭,還可裝配第五個(gè)光源版于鏡頭周邊。標(biāo)準(zhǔn)配置(標(biāo)準(zhǔn)版)的大成像面積為13×13 cm,大型版大成像面積達(dá)20×20 cm。既可對(duì)單個(gè)葉片進(jìn)行葉綠素?zé)晒獬上?,還可對(duì)整株植物進(jìn)行葉綠素?zé)晒獬上?,廣泛應(yīng)用于植物光合生理生態(tài)、植物逆境脅迫生理與易感性、氣孔功能、植物環(huán)境如土壤重金屬污染響應(yīng)與生物監(jiān)測(cè)、植物抗性、作物育種等研究。
應(yīng)用領(lǐng)域:
· 植物光合特性和代謝紊亂篩選
· 生物和非生物脅迫的檢測(cè)
· 植物抗脅迫能力或者易感性研究
· 氣孔非均一性研究
· 代謝混亂研究
· 長(zhǎng)勢(shì)與產(chǎn)量評(píng)估
· 植物——微生物交互作用研究
· 植物——原生動(dòng)物交互作用研究
功能特點(diǎn):
§ 模塊化,配置靈活,可自由安裝更換光源板、自由調(diào)整光源角度和高度、自由調(diào)整CCD鏡頭高度,方便被測(cè)植物的處理、操作等
§ 可自由選配不同波長(zhǎng)LEDs光源板,如選配青色光源板用于氣孔功能研究、選配紫外光源板用于多色熒光成像試驗(yàn)測(cè)量等
§ 成像面積大,大型版成像面積達(dá)20×20cm,可對(duì)整株植物甚至多株植物(如擬南芥等小型植物)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)成像分析
§ 高靈敏度CCD鏡頭,時(shí)間分辨率達(dá)50張每秒,快速捕捉葉綠素?zé)晒馑沧?/span>
§ 可進(jìn)行自動(dòng)重復(fù)成像測(cè)量,可設(shè)置一個(gè)實(shí)驗(yàn)程序(Protocols)自動(dòng)循環(huán)成像測(cè)量,成像測(cè)量數(shù)據(jù)自動(dòng)按時(shí)間日期存入計(jì)算機(jī)(帶時(shí)間戳)
§ 帶有Kautsky誘導(dǎo)效應(yīng)、熒光淬滅分析等各種通用實(shí)驗(yàn)程序(protocols),測(cè)量分析參數(shù)達(dá)50多個(gè)
§ 可選配TetraCam彩色成像模塊,大成像面積20×25cm,用于葉片或植物形態(tài)測(cè)量分析
§ 測(cè)量樣品包括葉片、花卉、果實(shí)、植物其它組織及整株植物、藻類等
技術(shù)參數(shù):
§ 成像面積:標(biāo)準(zhǔn)版成像面積達(dá)13×13cm,大型版成像面積達(dá)20×20cm,可對(duì)植物葉片、植物組織、藻類、苔蘚、地衣、整株植物或多株植物、96孔板、384孔板等進(jìn)行成像分析
§ 測(cè)量參數(shù):Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm', Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII, NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qL, QY, QY_Ln, Rfd, ETR等50多個(gè)葉綠素?zé)晒鈪?shù),每個(gè)參數(shù)均可顯示2維熒光彩色圖像
· 具備完備的自動(dòng)測(cè)量程序(protocol),可自由對(duì)自動(dòng)測(cè)量程序進(jìn)行編輯
a) Fv/Fm:測(cè)量參數(shù)包括Fo,F(xiàn)m,F(xiàn)v,QY等
b) Kautsky誘導(dǎo)效應(yīng):Fo,F(xiàn)p,F(xiàn)v,F(xiàn)t_Lss,QY,Rfd等熒光參數(shù)
c) 熒光淬滅分析:Fo,F(xiàn)m,F(xiàn)p,F(xiàn)s,F(xiàn)v,QY,ΦII,NPQ,Qp,Rfd,qL等50多個(gè)參數(shù)
d) 光響應(yīng)曲線LC:Fo,F(xiàn)m,QY,QY_Ln,ETR等熒光參數(shù)
e) PAR吸收與NDVI(選配)
f) GFP等靜態(tài)熒光成像測(cè)量(選配)
a) 圖像分辨率:720×560像素
b) 時(shí)間分辨率:每秒50幀
c) A/D 轉(zhuǎn)換分辨率:12位(4096灰度色階)
d) 像元尺寸:8.6µm×8.3µm
e) 通訊模式:千兆以太網(wǎng)
§ 高分辨率TOMI-2 CCD傳感器(選配)
a) 逐行掃描CCD
b) 圖像分辨率:1360×1024像素
c) 時(shí)間分辨率:在圖像分辨率下可達(dá)每秒20幀
d) A/D 轉(zhuǎn)換分辨率:16位(65536灰度色階)
e) 像元尺寸:6.45µm×6.45µm
f) 運(yùn)行模式:1)動(dòng)態(tài)視頻模式,用于葉綠素?zé)晒鈪?shù)測(cè)量;2)快照模式,用于GFP等熒光蛋白和熒光染料測(cè)量
g) 通訊模式:千兆以太網(wǎng)
§ 光源板:4塊大型高強(qiáng)度封裝LED光源板,每個(gè)光源板由8×9 LEDs陣列,光源板有效面積與成像面積相同,標(biāo)準(zhǔn)版13×13cm,大型版20×20cm
§ 測(cè)量光:標(biāo)配617nm紅光,其它波段可選,持續(xù)時(shí)間10µs–100µs可調(diào)
§ 雙色光化光:標(biāo)配為2紅光(617nm)+2白光,可選配2紅光(617nm)+2藍(lán)光(470nm)或其它波長(zhǎng)光源組合, Actinic1大光強(qiáng)300µmol(photons)/m2.s,Actinic2大光強(qiáng)2000µmol(photons)/m2.s;大光化學(xué)光可升級(jí)至3000µmol(photons)/m2.s
§ 飽和光閃:大光強(qiáng)4000µmol(photons)/m2.s,可升級(jí)至6000 µmol(photons)/m2.s
§ PAR吸收測(cè)量模塊(選配):遠(yuǎn)紅光740nm(FAR)、660nm雙色LEDs光源板與7位濾波輪及濾波片,用于測(cè)量PAR吸收及NDVI
§ GFP測(cè)量模塊(選配):藍(lán)色光化光源與7位濾波輪及濾波片,用于測(cè)量GFP(綠色熒光蛋白)
§ 7位濾波輪(選配):加裝不同波段濾波片,配合選配的光源板測(cè)量PAR吸收和GFP、YFP等穩(wěn)態(tài)熒光
§ 紫外LED光源板(選配):365nm或385nm,1)測(cè)量多色熒光(詳見FluorCam多光譜熒光成像系統(tǒng));2)測(cè)量wtGFP(野生型綠色熒光蛋白)、DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚,一種熒光染料)
§ 藍(lán)色LED光源板(選配):470nm,1)測(cè)量EGFP(增強(qiáng)型綠色熒光蛋白);2)用于氣孔功能研究
§ 綠色LED光源板(選配):530nm,測(cè)量YFP(黃色熒光蛋白)
§ 其他可選配光源板:品藍(lán)(447 nm),青色(505 nm),紅色(627 nm),深紅(655 nm),琥珀色(590 nm),遠(yuǎn)紅(740nm)等
*測(cè)量wtGFP、DAPI、EGFP、YFP等熒光蛋白或熒光染料還需要選配7位濾波輪,高分辨率CCD及相應(yīng)濾波片
§ FluorCam葉綠素?zé)晒獬上穹治鲕浖δ埽壕週ive(實(shí)況測(cè)試)、Protocols(實(shí)驗(yàn)程序選擇定制)、Pre–processing(成像預(yù)處理)、Result(成像分析結(jié)果)等功能菜單
§ 客戶定制實(shí)驗(yàn)程序協(xié)議(protocols):可設(shè)定時(shí)間(如測(cè)量光持續(xù)時(shí)間、光化學(xué)光持續(xù)時(shí)間、測(cè)量時(shí)間等)、光強(qiáng)(如不同光質(zhì)光化學(xué)光強(qiáng)度、飽和光閃強(qiáng)度、調(diào)制測(cè)量光等),具備實(shí)驗(yàn)程序語(yǔ)言和腳本,用戶也可利用Protocol菜單中的向?qū)С绦蚰0孀杂蓜?chuàng)建新的實(shí)驗(yàn)程序
§ 自動(dòng)測(cè)量分析功能:可設(shè)置一個(gè)實(shí)驗(yàn)程序(Protocol)自動(dòng)無(wú)人值守循環(huán)成像測(cè)量,重復(fù)次數(shù)及間隔時(shí)間客戶自定義,成像測(cè)量數(shù)據(jù)自動(dòng)按時(shí)間日期存入計(jì)算機(jī)(帶時(shí)間戳)
§ 快照(snapshot)模式:通過(guò)快照成像模式,可以自由調(diào)節(jié)光強(qiáng)、快門時(shí)間及靈敏度得到清晰突出的植物樣本穩(wěn)態(tài)熒光和瞬時(shí)熒光圖片
§ 成像預(yù)處理:程序軟件可自動(dòng)識(shí)別多個(gè)植物樣品或多個(gè)區(qū)域,也可手動(dòng)選擇區(qū)域(Region of interest,ROI)。手動(dòng)選區(qū)的形狀可以是方形、圓形、任意多邊形或扇形。軟件可自動(dòng)測(cè)量分析每個(gè)樣品和選定區(qū)域的熒光動(dòng)力學(xué)曲線及相應(yīng)參數(shù),樣品或區(qū)域數(shù)量不受限制(>1000)
§ 數(shù)據(jù)分析模式:具備“信號(hào)計(jì)算再平均”模式(算數(shù)平均值)和“信號(hào)平均再計(jì)算”模式,在高信噪比的情況下選用“信號(hào)計(jì)算再平均”模式,在低信噪比的情況下選擇“信號(hào)平均再計(jì)算”模式以過(guò)濾掉噪音帶來(lái)的誤差
§ 輸出結(jié)果:高時(shí)間解析度熒光動(dòng)態(tài)圖、熒光動(dòng)態(tài)變化視頻、熒光參數(shù)Excel文件、直方圖、不同參數(shù)成像圖、不同ROI的熒光參數(shù)列表等
§ 給光制度:靜態(tài)或動(dòng)態(tài)(竇式)
§ CCD檢測(cè)范圍:400–1000nm
§ 光譜響應(yīng):540nm處量子效率(70 %),400nm和650nm處轉(zhuǎn)降50%
§ 讀出噪音:低于12eRMS,典型10e
§ 滿阱容量:大于70,000 e (unbinned)
§ Bios:固件可升級(jí)
§ 通訊方式:千兆以太網(wǎng)
§ 供電電壓:90–240V
典型應(yīng)用:
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干旱、高溫等各種環(huán)境脅迫研究 葉綠素?zé)晒庾鳛閼?yīng)用的無(wú)損光合探針,可以靈敏地反應(yīng)植物在各種環(huán)境脅迫下的變化。上圖為玉米在不同模擬干旱條件下的葉綠素?zé)晒獬上駡D(Katarzyna,2015)。 | 植物病害/蟲害: 葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)同樣可以用于各種生物脅迫研究,尤其是脅迫早期篩查。上圖為煙草感染真菌后的各種葉綠素?zé)晒獬上瘢瑥亩鴮?duì)病害和植株抗性進(jìn)行定量分析(Tung,2013)。 |
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農(nóng)藥等化學(xué)毒害: FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)可以實(shí)現(xiàn)無(wú)人值守的監(jiān)測(cè)測(cè)量。上圖為菜豆對(duì)敵草隆吸收過(guò)程中的葉綠素?zé)晒獬上?,可見毒害隨葉脈的發(fā)展過(guò)程(Hartmut,2013)。 | 果實(shí)脅迫研究: FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)突破了傳統(tǒng)葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)只能測(cè)量葉片的限制,可以對(duì)幾乎各種植物樣品進(jìn)行測(cè)量。上圖為檸檬被熱水傷害后的葉綠素?zé)晒獬上瘢―avid,2005)。這一技術(shù)同樣可用于棉鈴的抗逆研究。 |
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抗性作物育種: 葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)可以直觀地比較不同品種的抗性差異。在篩選對(duì)除草劑抗性強(qiáng)的玉米品種與基因型時(shí),FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窨梢灾庇^并且定量地反映其抗性及產(chǎn)生毒害部位的差異(Kopsell,2011)。同時(shí),FluorCam具備的GFP等熒光蛋白成像功能,可直接應(yīng)用于分子育種。 | 植物表型研究: 葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)是植物表型及表型組學(xué)重要的研究技術(shù)。通過(guò)FluorCam葉綠素?zé)晒獬上窦夹g(shù)可以獲取植物表型相關(guān)的海量數(shù)據(jù)并構(gòu)建表型數(shù)據(jù)庫(kù)(Céline,2015)。 |
產(chǎn)地:歐洲