大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA Kit
參考價 | 面議 |
- 公司名稱 上海栩冉生物科技有限公司
- 品牌
- 型號
- 所在地 上海市
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2017/12/10 17:53:29
- 訪問次數(shù) 46
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大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA Kit上海素爾生物科技有限公司提供,1-2個工作日發(fā)貨,提供免費代測服務,收到標本起一周內提供原始數(shù)據(jù)和zui終數(shù)據(jù),提供ELISA各種樣本收集、處理、保存方法,歡迎您致電咨詢庫存狀態(tài),售后說明等。
大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA Kit上海素爾生物為您傾情供應,**技術,嚴格工藝流程,*抗體/抗原,嚴格QC檢測后方可出庫,請放心購買!致電:,!
中文名稱:大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA Kit
英文名稱:Rat Thyroid-Peroxidase,TPO ELISA Kit
儲存溫度:-20℃(較長時間不用時);2-8℃(頻繁使用時)
有效期:6個月
產品供應商:上海素爾生物科技有限公司
1-2個工作日發(fā)貨,提供免費代測服務,收到標本起一周內提供原始數(shù)據(jù)和zui終數(shù)據(jù)
ELISA各種樣本收集、處理、保存方法
1. 血清標本收集、處理、保存方法:
用無熱原、無內毒素的試管或離心管采集血液標本,全血標本室溫放置1-2 h或4℃過夜,然后4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。
2. 血漿標本收集、處理、保存方法:
根據(jù)樣本要求選擇EDTA或*或枸緣酸鈉作為抗凝劑,用含抗凝劑的*或離心管采集血液標本,室溫混合20 min左右,然后4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清即為血漿。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。
3. 尿液標本收集、處理、保存方法:
用干凈容器收集尿液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。
4. 唾液標本收集、處理、保存方法:
用干凈離心管收集唾液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。
5. 細胞標本收集、處理、保存方法:
(1)細胞培養(yǎng)上清
取細胞培養(yǎng)上清到干凈離心管中,4℃、3000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。
收集細胞培養(yǎng)液,4℃、3000 rpm/min離心20 min,棄去上清,用預冷的PBS(0.01M,PH 7.4)洗滌三次。加入適量的預冷PBS或細胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細胞。通過反復凍融,使細胞充分裂解。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min,除去細胞碎片,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。
6. 植物標本收集、處理、保存方法:
取適量大小組織塊(一般0.2-0.5 g),用預冷的PBS緩沖液(0.01M,PH 7.4)漂洗三次,濾紙拭干水分。準確稱重,放入勻漿管中,加入4倍體積的勻漿介質(0.05 mol/L Tris-HCl,pH 7.4 PBS緩沖液)于勻漿管中,冰水浴條件下,剪碎組織塊,手工勻漿或機器勻漿,制成勻漿液。4℃、10000 rpm/min離心20 min,取上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。
7. 糞便標本收集、處理、保存方法:
采集時用干凈的竹簽挑取糞便樣本到離心管中,向離心管中加入適量PBS緩沖液(0.01M,PH 7.4),攪拌均勻。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。
8. 組織標本收集、處理、保存方法:
將組織樣本用PBS緩沖液(0.01M,PH 7.4)沖洗,洗去組織表面殘留的血液或雜質。將組織塊稱重,記錄后剪碎(碎塊盡量小)。將組織按一定的比例(通常組織重量:PBS體積=1:9)加入預冷的PBS緩沖液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)中勻漿,勻漿時置于冰上。吸取勻漿液到離心管中,4℃、10000 rpm/min離心20 min,小心收集上清。置于-20℃(1-2周)或-80℃保存(較長時間),避免反復凍融。
大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA Kit
1.E大鼠二氨氧化酶(DAO)ELISA試劑盒LISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完, 板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,*使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
試劑盒靈敏度、精密度、穩(wěn)定性
1. 靈敏度:有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質的zui低量的能力;2)為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。
2. 特異性:常用交叉反應率表示。其越高說明特異性越好。
3. 精密度:ELISA試劑一般指其批內CV,其值應小于15%;定量試劑應同時考察線性范圍
4. 穩(wěn)定性:試劑在規(guī)定條件下能儲存的時間,一般采用破壞性試驗即將試劑存放于37℃保存,定期測定其靈敏度,特異性和精密度等指標,直到其質量指標開始下降為止,通常認為37℃每穩(wěn)定一天相當于4-10℃保存一個半月。
5. 簡便性:指在不影響試劑的前三項指標的前題下,實驗和測定步驟越少越好,在定性試驗中結果判斷簡單明了,定量試驗結果計算也應簡單。
6. 安全性:指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。
7. 經濟性:試劑在同等質量條件下通過大規(guī)模生產或技術進步降低成本而市場價格比較合理。
試劑評價:需要有的確證方法確證的樣品進行檢測,一般實驗室不易取得此類樣品,每新購進一次試劑評價也很麻煩??梢酝ㄟ^間接的回收實驗對試劑進行選擇
ELISA試劑盒常見問題及分析
問題分析
若試驗效果不好,請及時對顯色結果拍照,保留未用板條及未使用試劑,并妥善保存,然后我公司為你解決問題。同時您也可以參考以下資料:
問題描述 | 可能原因 | 相應對策 |
標準曲線梯度差 | 吸液或加液不準 | 檢查移液器及吸頭 |
標準品稀釋不正確 | 稀釋標準品時,反復吹打,確保*混勻 | |
洗滌不* | 保證洗滌時間和洗滌次數(shù)及每孔的加液量 | |
顯色很弱或無色 | 孵育時間太短 | 保證充足的孵育時間 |
實驗溫度不正確 | 使用*的實驗溫度 | |
試劑提及不夠或漏加 | 檢查洗液及加液過程,保證所有試劑按順序足量添加 | |
稀釋不正確 | ||
讀數(shù)數(shù)值低 | 酶標儀設置不正確 | 在酶標儀上檢查波長及濾光片設置 |
提前打開酶標儀預熱 | ||
變異系數(shù)大 | 加液不正確 | 檢查加液情況 |
背景值高 | 檢測抗體的工作濃度 | 使用*的稀釋倍數(shù) |
酶標板洗滌不* | 重新閱讀操作手冊,保證清洗*;如果用自動洗板機,請檢查所有的出口是否有堵塞 | |
洗液有污染 | 配置新鮮的洗液 | |
靈敏度低 | ELISA試劑盒保存 | 按照說明書要求保存相關試劑 |
讀數(shù)前未終止 | OD讀數(shù)前應在每孔中加入終止液 |
大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA Kit價格/說明書 高品質產品:
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小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA Kit
小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA Kit
小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α)ELISA Kit
小鼠肌球蛋白(MYS)ELISA Kit
小鼠主要組織相容性復合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)ELISA Kit
小鼠GATA結合蛋白4(GATA4)ELISA Kit
小鼠干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA Kit
小鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA Kit
小鼠抗*Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA Kit
小鼠生長激素釋放多肽(GHRP)ELISA Kit
小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISA Kit
小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA Kit
小鼠血栓前體蛋白(TpP)ELISA Kit
小鼠*釋放激素(GnRH)ELISA Kit
小鼠抑制素B(INH-B)ELISA Kit
小鼠促甲狀腺素釋放激素(TRH)ELISA Kit
小鼠促腎上皮質激素釋放激素(CRH)ELISA Kit
小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA Kit
小鼠糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA Kit
小鼠淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA Kit
小鼠可溶性血小板內皮細胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA Kit
小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA Kit
小鼠透明質酸(HA)ELISA Kit
小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)ELISA Kit
小鼠膽囊收縮素/腸促*肽(CCK)ELISA Kit
小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA Kit
小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)ELISA Kit
小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA Kit
小鼠25羥基*3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA Kit
小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA Kit
小鼠*(VC)ELISA Kit
小鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)ELISA Kit
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小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA Kit
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*個主要的參數(shù)是洗滌量。自動洗板機會分配洗滌液。如果你之前遭遇過高背景,那么不要猶豫,將洗滌量調為高,是比包被體積更高。太少的洗滌液會讓一部分分析表面洗滌不到,從而明顯增加背景。所有反應孔的洗滌量必須相同。ELISA板的制造商通常會在試劑盒的使用手冊中列出包被量。行業(yè)中通常使用的包被量是200µl。如果你的試劑盒也是這樣,那么制造商可能會建議使用300µl洗滌液進行洗滌,以便清潔整個反應孔的壁。一般來說,洗滌量越高,則孵育步驟殘留的抗體或抗原量就越少。
第二個影響洗滌效果的主要參數(shù)是洗滌循環(huán)的量。當然,洗滌次數(shù)越多,背景越低。然而,太多次的洗滌會降低信號強度,使其難以測定。通常的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復洗滌三次。不過,ELISA板的制造商會對洗滌次數(shù)提出建議。一般而言,制造商包被平板需要的洗滌次數(shù)比用戶包被的平板要少。對于用戶包被的ELISA板,必須優(yōu)化洗滌次數(shù)??刂葡礈炝亢拖礈齑螖?shù)的另一種方法是加入過量的洗滌液。一般來說,96孔板的每個孔能容納330至460 µl。不過,有些自動化洗板機可設置程序,分配遠遠超出這個量的洗滌液,比如1 ml。它是如何做到的呢?其實很簡單,就是在分液的同時打開吸液功能。換句話說,隨著分液器分配更多的液體,抽吸器也將液體吸出。這種技術能增加洗滌量,但不會溢出到其他孔中。
另外,還有一些參數(shù)會影響洗滌步驟的效果。這些參數(shù)包括吸液高度和吸入位置,這兩者都能調整,以降低背景(殘留量)和差異。殘留液體中包含未結合的抗原或抗體,它們會增加背景信號。殘留量越小,殘留液體越少,轉移到下一步的干擾液體也就越少。吸液高度會明顯影響殘留量;如果洗滌吸頭與反應孔底部的距離稍大,那就會讓殘留量急劇增加。反之,如果洗滌吸頭壓著反應孔底部,那么也會使吸液效率降低,殘留量增加。目前的洗板機一般使用兩種類型的洗頭:剛性和浮動。浮動洗頭中的吸頭可在洗滌過程中自由上下移動,而剛性洗頭則固定在適當?shù)奈恢?。使用剛性洗頭的洗滌操作在優(yōu)化起來更為復雜,因為你需要非常仔細地調整吸液高度。如果你們實驗室使用幾種不同的板,那可能會很耗時。在使用浮動洗頭時,吸頭會降到反應孔的底部。調整高度就不是很重要,因此洗頭會下降到底部。抽吸的位置也對殘留量有著重要影響;如果每個孔只使用一個抽吸點(這很常見,因為更快),那么抽吸的位置需要優(yōu)化。*的位置取決于洗頭的性狀,但它幾乎不在反應孔的中間,即使這是所有洗頭zui常見的默認位置。一般來說,*位置在孔中間與孔壁之間的某處。反應孔的形狀也會影響殘留量。C形底(平底圓角)的微孔板一般會比那些平底尖角的微孔板殘留量更低。如果沒有自動洗板機,采用手工洗滌,那么也需要注意幾點。使用8道或12道微量移液器,采用倒吸的方法進行洗滌;不同廠家的洗液不宜相互混用。洗板時需保證微孔板平放,將洗滌液注滿各孔,但盡量避免漏液溢液,以每孔300 µl為宜;板洗次數(shù)一般為3次,要保證洗板的浸泡時間,每次浸泡時間一般為30-60 秒;盡量減少洗液殘留量,*每次洗板后進行拍板,并及時更換吸水紙,避免吸水紙的碎屑粘到反應孔內。
大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)ELISA Kit看起來很簡單,但是在實際操作過程中,也不能掉以輕心,還是應該仔細檢查洗滌步驟,才能獲得準確的結果。
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