大鼠破骨細胞分化因子（ODF）ELISA Kit上海素爾生物科技有限公司提供，1-2個工作日發(fā)貨，提供免費代測服務，收到標本起一周內提供原始數據和zui終數據，提供ELISA各種樣本收集、處理、保存方法，歡迎您致電咨詢庫存狀態(tài)，售后說明等。

大鼠破骨細胞分化因子(ODF)ELISA Kit上海素爾生物為您傾情供應，**技術，嚴格工藝流程，*抗體/抗原，嚴格QC檢測后方可出庫，請放心購買！致電：，！ 

中文名稱：Rat osteoclast differentiation factor,ODF ELISA Kit

英文名稱：大鼠破骨細胞分化因子(ODF)ELISA Kit

儲存溫度：：-20℃(較長時間不用時)；2-8℃(頻繁使用時)

有效期：6個月

產品供應商：上海素爾生物科技有限公司

1-2個工作日發(fā)貨，提供免費代測服務，收到標本起一周內提供原始數據和zui終數據

ELISA各種樣本收集、處理、保存方法

1. 血清標本收集、處理、保存方法：

用無熱原、無內毒素的試管或離心管采集血液標本，全血標本室溫放置1－2 h或4℃過夜，然后4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。

2. 血漿標本收集、處理、保存方法：

根據樣本要求選擇EDTA或*或枸緣酸鈉作為抗凝劑，用含抗凝劑的*或離心管采集血液標本，室溫混合20 min左右，然后4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清即為血漿。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。避免使用溶血或高血脂的標本。

3. 尿液標本收集、處理、保存方法：

用干凈容器收集尿液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

4. 唾液標本收集、處理、保存方法：

用干凈離心管收集唾液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

細胞標本收集、處理、保存方法:

（1）細胞培養(yǎng)上清

 取細胞培養(yǎng)上清到干凈離心管中，4℃、3000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

細胞裂解液

收集細胞培養(yǎng)液，4℃、3000 rpm/min離心20 min，棄去上清，用預冷的PBS（0.01M，PH 7.4）洗滌三次。加入適量的預冷PBS或細胞裂解液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）重懸細胞。通過反復凍融，使細胞充分裂解。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min，除去細胞碎片，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

6. 植物標本收集、處理、保存方法：

取適量大小組織塊（一般0.2－0.5 g），用預冷的PBS緩沖液（0.01M，PH 7.4）漂洗三次，濾紙拭干水分。準確稱重，放入勻漿管中，加入4倍體積的勻漿介質（0.05 mol/L Tris-HCl，pH 7.4 PBS緩沖液）于勻漿管中，冰水浴條件下，剪碎組織塊，手工勻漿或機器勻漿，制成勻漿液。4℃、10000 rpm/min離心20 min，取上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

7. 糞便標本收集、處理、保存方法：

采集時用干凈的竹簽挑取糞便樣本到離心管中，向離心管中加入適量PBS緩沖液（0.01M，PH 7.4），攪拌均勻。然后4℃、10000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

8. 組織標本收集、處理、保存方法：

將組織樣本用PBS緩沖液（0.01M，PH 7.4）沖洗，洗去組織表面殘留的血液或雜質。將組織塊稱重，記錄后剪碎（碎塊盡量?。?。將組織按一定的比例（通常組織重量：PBS體積=1：9）加入預冷的PBS緩沖液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）中勻漿，勻漿時置于冰上。吸取勻漿液到離心管中，4℃、10000 rpm/min離心20 min，小心收集上清。置于-20℃（1－2周）或-80℃保存（較長時間），避免反復凍融。

大鼠破骨細胞分化因子(ODF)ELISA Kit

1．ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完， 板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，*使用排槍加樣。

4．請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。

5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

試劑盒靈敏度、精密度、穩(wěn)定性

1. 靈敏度：有二層含義，1）為試劑檢出被檢物質的zui低量的能力；2）為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。 

2. 特異性：常用交叉反應率表示。其越高說明特異性越好。 

3. 精密度：ELISA試劑一般指其批內CV，其值應小于15%；定量試劑應同時考察線性范圍

4. 穩(wěn)定性：試劑在規(guī)定條件下能儲存的時間，一般采用破壞性試驗即將試劑存放于37℃保存，定期測定其靈敏度，特異性和精密度等指標，直到其質量指標開始下降為止，通常認為37℃每穩(wěn)定一天相當于4-10℃保存一個半月。 

5. 簡便性：指在不影響試劑的前三項指標的前題下，實驗和測定步驟越少越好，在定性試驗中結果判斷簡單明了，定量試驗結果計算也應簡單。

6. 安全性：指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。 

7. 經濟性：試劑在同等質量條件下通過大規(guī)模生產或技術進步降低成本而市場價格比較合理。 

試劑評價：需要有的確證方法確證的樣品進行檢測，一般實驗室不易取得此類樣品，每新購進一次試劑評價也很麻煩。可以通過間接的回收實驗對試劑進行選擇

ELISA試劑盒常見問題及分析

問題分析

若試驗效果不好，請及時對顯色結果拍照，保留未用板條及未使用試劑，并妥善保存，然后我公司為你解決問題。同時您也可以參考以下資料：

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*個主要的參數是洗滌量。自動洗板機會分配洗滌液。如果你之前遭遇過高背景，那么不要猶豫，將洗滌量調為高，是比包被體積更高。太少的洗滌液會讓一部分分析表面洗滌不到，從而明顯增加背景。所有反應孔的洗滌量必須相同。ELISA板的制造商通常會在試劑盒的使用手冊中列出包被量。行業(yè)中通常使用的包被量是200µl。如果你的試劑盒也是這樣，那么制造商可能會建議使用300µl洗滌液進行洗滌，以便清潔整個反應孔的壁。一般來說，洗滌量越高，則孵育步驟殘留的抗體或抗原量就越少。

第二個影響洗滌效果的主要參數是洗滌循環(huán)的量。當然，洗滌次數越多，背景越低。然而，太多次的洗滌會降低信號強度，使其難以測定。通常的做法是在每次抗體或抗原孵育后重復洗滌三次。不過，ELISA板的制造商會對洗滌次數提出建議。一般而言，制造商包被平板需要的洗滌次數比用戶包被的平板要少。對于用戶包被的ELISA板，必須優(yōu)化洗滌次數?？刂葡礈炝亢拖礈齑螖档牧硪环N方法是加入過量的洗滌液。一般來說，96孔板的每個孔能容納330至460 µl。不過，有些自動化洗板機可設置程序，分配遠遠超出這個量的洗滌液，比如1 ml。它是如何做到的呢？其實很簡單，就是在分液的同時打開吸液功能。換句話說，隨著分液器分配更多的液體，抽吸器也將液體吸出。這種技術能增加洗滌量，但不會溢出到其他孔中。

另外，還有一些參數會影響洗滌步驟的效果。這些參數包括吸液高度和吸入位置，這兩者都能調整，以降低背景（殘留量）和差異。殘留液體中包含未結合的抗原或抗體，它們會增加背景信號。殘留量越小，殘留液體越少，轉移到下一步的干擾液體也就越少。吸液高度會明顯影響殘留量；如果洗滌吸頭與反應孔底部的距離稍大，那就會讓殘留量急劇增加。反之，如果洗滌吸頭壓著反應孔底部，那么也會使吸液效率降低，殘留量增加。目前的洗板機一般使用兩種類型的洗頭：剛性和浮動。浮動洗頭中的吸頭可在洗滌過程中自由上下移動，而剛性洗頭則固定在適當的位置。使用剛性洗頭的洗滌操作在優(yōu)化起來更為復雜，因為你需要非常仔細地調整吸液高度。如果你們實驗室使用幾種不同的板，那可能會很耗時。在使用浮動洗頭時，吸頭會降到反應孔的底部。調整高度就不是很重要，因此洗頭會下降到底部。抽吸的位置也對殘留量有著重要影響；如果每個孔只使用一個抽吸點（這很常見，因為更快），那么抽吸的位置需要優(yōu)化。*的位置取決于洗頭的性狀，但它幾乎不在反應孔的中間，即使這是所有洗頭zui常見的默認位置。一般來說，*位置在孔中間與孔壁之間的某處。反應孔的形狀也會影響殘留量。C形底（平底圓角）的微孔板一般會比那些平底尖角的微孔板殘留量更低。如果沒有自動洗板機，采用手工洗滌，那么也需要注意幾點。使用8道或12道微量移液器，采用倒吸的方法進行洗滌；不同廠家的洗液不宜相互混用。洗板時需保證微孔板平放，將洗滌液注滿各孔，但盡量避免漏液溢液，以每孔300 µl為宜；板洗次數一般為3次，要保證洗板的浸泡時間，每次浸泡時間一般為30-60 秒；盡量減少洗液殘留量，*每次洗板后進行拍板，并及時更換吸水紙，避免吸水紙的碎屑粘到反應孔內。

大鼠破骨細胞分化因子(ODF)ELISA Kit看起來很簡單，但是在實際操作過程中，也不能掉以輕心，還是應該仔細檢查洗滌步驟，才能獲得準確的結果。