轉(zhuǎn)頭的k 值
轉(zhuǎn)頭的k 值(又稱k 因子或k 系數(shù))用以衡量轉(zhuǎn)頭的沉淀效率。所有的離心機(jī)廠家在轉(zhuǎn)頭出廠時(shí)都計(jì)算了制備型轉(zhuǎn)頭的k 值,轉(zhuǎn)頭k 值通過在轉(zhuǎn)頭運(yùn)行至zui|高轉(zhuǎn)速、離心管裝滿樣品時(shí)計(jì)算得到的,其計(jì)算公式如下:
由上得出轉(zhuǎn)頭k 值是與轉(zhuǎn)頭的zui高轉(zhuǎn)速和形狀有關(guān)。
zui高轉(zhuǎn)速*一樣的轉(zhuǎn)頭,離心管與軸的角度越小,也就是rmax / rmin 越小,k 值就越小。所以制備型超速離心機(jī)的四類轉(zhuǎn)頭的k值如下:水平轉(zhuǎn)頭k 值 > 定角轉(zhuǎn)頭k 值 > 近垂直轉(zhuǎn)頭k 值 > 垂直轉(zhuǎn)頭k 值。
如果在離心時(shí),轉(zhuǎn)頭沒有運(yùn)行到zui高轉(zhuǎn)速,那么rpm 就不能使用zui高轉(zhuǎn)速的k 值,必須將轉(zhuǎn)頭實(shí)際運(yùn)行轉(zhuǎn)速代入公式(3)來計(jì)算實(shí)際的k 值。
由公式(5)可以看出,轉(zhuǎn)頭k 值是評(píng)估轉(zhuǎn)頭離心效率的一個(gè)指標(biāo),對(duì)于沉淀同一顆粒,轉(zhuǎn)頭k 值越小,顆粒沉淀所需要的時(shí)間就越短,也就是離心效率越高;反之,轉(zhuǎn)頭k 值越大,顆粒沉淀所需要的時(shí)間就越長,轉(zhuǎn)頭的離心效率越低。
舉例:分離沉降系數(shù)為 15 S 的蛋白,如果用的轉(zhuǎn)頭k 值是15,那么沉降該蛋白顆粒所需要的時(shí)間是:
t = k/s = 15/15 = 1 小時(shí)
如果用的轉(zhuǎn)頭k 值是18,那么沉降所需的時(shí)間是:
t = k/s = 18/15 = 1.2 小時(shí)
已知一個(gè)轉(zhuǎn)頭k 值和沉淀所需要的時(shí)間,如果用另一個(gè)轉(zhuǎn)頭來沉淀同樣的顆粒,可以用以下公式來計(jì)算需要沉淀的時(shí)間:
如果該轉(zhuǎn)頭不是在zui高轉(zhuǎn)速下運(yùn)行,或者樣品沒有裝滿,又或者換用了其他更小的離心管(例如g-MAX 管等),相應(yīng)k 值都會(huì)發(fā)生改變,相應(yīng)離心所需的時(shí)間也需要重新計(jì)算。
綜上所述,k 因子已經(jīng)綜合考慮了離心的轉(zhuǎn)速、相對(duì)離心力以及樣品在zui小半徑和zui大半徑等位置的受力改變情況,還有顆粒沉降的行程等因素,是計(jì)算離心時(shí)間、評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)頭離心效率的zui準(zhǔn)確和zui重要指標(biāo)。
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