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毛細管電泳儀常見故障處理方法(二)

   2020年08月06日 13:57  
  【儀器網(wǎng) 解決方案】毛細管電泳儀的主要部件包括直流高壓電源、毛細管、電極和電極槽、沖洗進樣系統(tǒng)、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等。之前我們已經(jīng)介紹了造成毛細管電泳儀電流不穩(wěn)定、基線不穩(wěn)定以及分離效率差的原因以及解決方法,但是在毛細管電泳儀的實際應(yīng)用過程中,遷移時間重現(xiàn)性差和峰面積重現(xiàn)性差也是比較常見的故障。
 
  四、遷移時間重現(xiàn)性差
 
  1、樣品吸附到毛細管壁
 
  緩沖液導(dǎo)致的EOF變化(特別是磷酸鹽和表面活性劑)或樣品吸附,老化毛細管并要有足夠的平衡時間,更換毛細管。
 
  2、管壁電荷滯后
 
  在高(或低)的PH條件下老化毛細管和使用低(或高)PH運行緩沖液引起,避免PH差異且要有足夠的平衡時間。
 
  3、緩沖液組分變化
 
  (1)電解導(dǎo)致的PH變化,更新緩沖液。
 
  (2)緩沖液揮發(fā),扣緊緩沖液瓶蓋和降低樣品盤溫度。
 
  (3)再生溶液廢液流進了出口緩沖液,使用單獨的樣品瓶收集廢液。
 
  (4)再生溶液遺留在緩中液瓶中,先將毛細管插入單獨的緩)中液瓶或水瓶中。
 
  4、緩沖液瓶液面不一致
 
  生成層流,使緩沖液瓶液面一致。如果不更新緩沖液,就不要使用入口瓶沖洗毛細管。
 
  5、不同批次毛細管的硅羥基含量不同
 
  內(nèi)壁電荷差異和EOF波動,測定EOF并歸一化。
 
  6、溫度變化
 
  粘度和EOF變化,使用可控溫的毛細管的系統(tǒng)。
 
  五、峰面積重現(xiàn)性差
 
  1、樣品記憶效應(yīng)
 
  外部進樣,使用進樣端平整光滑的毛細管除去毛細管端口外面的聚酰亞胺涂層
 
  2、簡單地將毛細管伸進樣品中引起的零進樣
 
  外部進樣,不能*消除,增大進樣量以消除該效應(yīng)。
 
  3、樣品吸附到毛細管壁
 
  峰形變差(拖尾)未洗脫樣品,改變緩沖液的PH,增大緩沖液濃度使用添加劑比如纖維素或者涂層毛細管。
 
  4、信噪比低
 
  積分誤差,優(yōu)化積分參數(shù),增大樣品濃度,使用峰高。
 
  5、毛細管環(huán)境的溫度變化
 
  粘度和進樣量的變化,使用可控溫的毛細管的系統(tǒng)。

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