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【儀器網(wǎng) 解決方案】暗視野顯微鏡也叫超顯微鏡，常用來(lái)觀察未染色的透明樣品。
暗視野顯微鏡問(wèn)題及解決方法
1、問(wèn)題：
有足夠的照明，使標(biāo)本可見(jiàn)，或標(biāo)本是可見(jiàn)的，但很微弱。
解決方案：燈電壓可以被設(shè)置得太低，或燈泡可能沒(méi)有足夠的強(qiáng)度照射試樣。將電壓升高到大約12伏（12伏，100瓦鎢鹵素?zé)襞荩┗蚋鼡Q光源，如果可能的話，與更大的強(qiáng)度。如果不解決這個(gè)問(wèn)題，檢查臺(tái)下冷凝器，以確保它正確的位置用適當(dāng)大小的視場(chǎng)光闌。此外，還要檢查顏色和/或中性密度濾光片，偏光板，相位差板，或任何其他組件，可能會(huì)降低光照強(qiáng)度的光路， 如果這個(gè)問(wèn)題發(fā)生的高數(shù)值孔徑反射式冷凝器，檢查做出一定冷凝器ding級(jí)鏡頭正確涂油的顯微鏡載片上的底部。如果浸沒(méi)接觸已被打破，重新申請(qǐng)了冷凝器的油和機(jī)架，直到頂端透鏡*浸在油中和底部的滑動(dòng)接觸。
2、問(wèn)題：
視場(chǎng)的中心降低光照強(qiáng)度，有一個(gè)暗點(diǎn)，但在外圍的對(duì)象都亮起，顯示正常。
解決方案：臺(tái)下聚光器位置不正確或光站的目標(biāo)是錯(cuò)誤的大小。小心機(jī)架冷凝器向上和向下，同時(shí)在視場(chǎng)中觀察試樣。檢查做出一定的冷凝器孔徑和視場(chǎng)光闌設(shè)置敞開(kāi)位置。如果這并不影響照明，改變視場(chǎng)光闌尺寸使其稍大或稍小，然后重新檢查照明。 偶爾出現(xiàn)此問(wèn)題時(shí)使用過(guò)厚（大于標(biāo)準(zhǔn)一毫米）顯微鏡載玻片。使用千分尺或一組表卡尺來(lái)確定厚度滑動(dòng)和滑動(dòng)/蓋玻片組合。如果滑動(dòng)太厚，要么改變到正確的厚度的滑動(dòng)或檢查冷凝器，以確定它是否可以調(diào)整，以補(bǔ)償不同厚度的幻燈片。
3、問(wèn)題：
燈往往有一個(gè)很短的壽命，燈泡內(nèi)部有涂層的黑色蒸發(fā)的鎢燒結(jié)。
解決方案：長(zhǎng)時(shí)間在過(guò)高的電壓，這肯定會(huì)影響其壽命的燈泡已使用。更換燈泡減少燈電壓經(jīng)過(guò)觀察和/或試樣的顯微攝影。
4、問(wèn)題：
圖像有明場(chǎng)暗區(qū)的中心的帶或不帶外周。
解決方案：這個(gè)問(wèn)題是典型的臺(tái)下冷凝器時(shí)，被錯(cuò)誤地集中或場(chǎng)站太小。恢復(fù)明場(chǎng)，并重新建立科勒照明的條件下，再重復(fù)暗場(chǎng)的過(guò)程中，確保冷凝器集中。如果這沒(méi)有幫助，增加視場(chǎng)光闌的大小，直到建立適當(dāng)?shù)陌祱?chǎng)條件， 當(dāng)使用目標(biāo)具有太高的數(shù)值孔徑為暗場(chǎng)聚光，也可能出現(xiàn)這個(gè)問(wèn)題。如果是在目標(biāo)內(nèi)部的可變光闌，降低光圈開(kāi)度的大小，以確定是否太多的斜光進(jìn)入物鏡鏡頭前面。此外，它可能有助于增加視場(chǎng)光闌的大小或改變反射的暗場(chǎng)聚光更高的數(shù)值孔徑。
5、問(wèn)題：
視場(chǎng)的外圍，只有一側(cè)是光明的。
解決方案：檢查物鏡轉(zhuǎn)換器，以確保正確地定位在顯微鏡的光軸的目標(biāo)。有一個(gè)制動(dòng)停止，正確定位目標(biāo)時(shí)，應(yīng)該產(chǎn)生積極的“咔嚓”。問(wèn)題也可能發(fā)生，如果不能正確居中視場(chǎng)光闌。卸下目鏡和相望遠(yuǎn)鏡放置在眼管（或使用貝特朗鏡頭），然后使用定心螺絲正確對(duì)齊視場(chǎng)光闌。
6、問(wèn)題：
試樣圖像不清晰，缺乏足夠的對(duì)比度和細(xì)節(jié)。
解決方案：暗視野顯微鏡標(biāo)本可能不適合。許多染色標(biāo)本沒(méi)有足夠的散射光，暗場(chǎng)條件下能清楚成像。用試樣的厚度也可能是一個(gè)問(wèn)題，因?yàn)榉浅１〉臉悠吠怀上褚约芭c斜光線從暗視野冷凝器發(fā)射。這提高了標(biāo)本的對(duì)比，以確定是否變更明場(chǎng)，相襯，DIC，霍夫曼調(diào)制對(duì)比度。
7、問(wèn)題：
明亮區(qū)域是重點(diǎn)妨礙觀看和/或暗場(chǎng)標(biāo)本的顯微攝影。
解決方案：這可能是由于灰塵，頭發(fā)，纖維，和/或污物污染的光學(xué)表面冷凝器上方的某處。*清潔試樣滑動(dòng)，光學(xué)級(jí)紙巾或棉球。有時(shí)候，這個(gè)問(wèn)題的產(chǎn)生是由于在物鏡前透鏡的污染。小心松開(kāi)其所在地物鏡轉(zhuǎn)換器的目標(biāo)，慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)，同時(shí)通過(guò)目鏡觀察樣品。，如果梗阻一起旋轉(zhuǎn)的目標(biāo)，那么它可能是由于前透鏡上的灰塵。取出的目標(biāo)和滋潤(rùn)鏡頭前輕輕呼氣，然后再用鏡頭紙或棉簽包裹的長(zhǎng)木桿。更換的目標(biāo)和檢查，以一定的梗阻已被*刪除。
8、問(wèn)題：
背景是均勻的照明，但不是*黑暗或會(huì)出現(xiàn)灰色的顏色。
解決方案：這個(gè)問(wèn)題通常發(fā)生在不透明場(chǎng)站太小，客觀。卸下目鏡和查看一個(gè)光路中的樣本的情況下的目標(biāo)使用一個(gè)相位望遠(yuǎn)鏡或伯特蘭透鏡的后焦面上。整個(gè)背部焦平面應(yīng)該是黑暗，沒(méi)有任何出現(xiàn)的四周邊緣，明亮的光線。如果在物鏡的后焦面的光的弧或圓的觀察，更改一個(gè)稍微大的視場(chǎng)光闌。此外，降低視場(chǎng)光闌的大小，將有助于抑制眩光和生產(chǎn)一個(gè)漆黑的背景（要小心，不要關(guān)閉此虹膜光圈太多）。
9、問(wèn)題：
燈泡冷凝器的圖像的視場(chǎng)部分地填充，模糊試樣的詳細(xì)信息。
解決方案：滑動(dòng)可能太薄或冷凝器可能被調(diào)得太高。厚度測(cè)量顯微鏡幻燈片，并進(jìn)行檢查，以確定油接觸不破。如果遇到困難，保持幻燈片油的底部，嘗試使用較厚的幻燈片。
10、問(wèn)題：
顏色顯示在背景中，或使背景光線不均與灰鑄鐵。
解決方案：這個(gè)問(wèn)題往往出現(xiàn)很厚，或當(dāng)太多的光散射污染工件的安裝介質(zhì)中捕獲整個(gè)坐騎。關(guān)閉視場(chǎng)光闌試樣滑動(dòng)和旋轉(zhuǎn)，以找到好的方向，然后確定問(wèn)題是否已得到糾正。試樣被重新安裝在一個(gè)較薄的安裝或安裝介質(zhì)，可能需要進(jìn)行過(guò)濾。小心地用柔軟的鏡頭紙或棉簽清潔整個(gè)顯微鏡載玻片和蓋玻片。
11、問(wèn)題：
當(dāng)于水性坐騎，觀賞水生生物標(biāo)本漂在一個(gè)單一的方向不斷，難以觀察和顯微攝影。
解決方案：對(duì)流，正在建立在蓋玻片的邊緣，由于緩慢蒸發(fā)。將胎圈凡士林或Cytoseal的蓋玻片周圍介質(zhì)的外周安裝到顯微鏡載片上，牢固地密封。商業(yè)產(chǎn)品可用，可以加入到水中，緩慢的移動(dòng)這些分鐘生物體，使它們更容易拍攝。
12、問(wèn)題：
當(dāng)觀看試樣通過(guò)10x物鏡的視場(chǎng)的中心，有一個(gè)長(zhǎng)圓形的光點(diǎn)。
解決方案：該燈冷凝器可能會(huì)錯(cuò)誤地聚焦或擴(kuò)散過(guò)濾器可能會(huì)丟失，導(dǎo)致圖像出現(xiàn)在視場(chǎng)中的燈絲。重新聚焦聚光，并在光路中有一個(gè)擴(kuò)散濾波。
13、問(wèn)題：
視場(chǎng)有亮點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)清晰對(duì)焦的標(biāo)本有問(wèn)題。
解決方案：可能被困在小氣泡與冷凝器之間的頂部和底部的顯微鏡載片上的油。卸下目鏡（或插入一個(gè)勃氏鏡）觀察的目標(biāo)的后焦平面上，將是可見(jiàn)的氣泡。為了彌補(bǔ)，斷油接觸，并用棉簽除去殘留的氣泡。清理多余的油，然后從冷凝器的前鏡頭和顯微鏡幻燈片應(yīng)用干凈鏡頭滴油。如果問(wèn)題仍然存在，*清潔所有的光學(xué)表面，前重新申請(qǐng)機(jī)油。
14、問(wèn)題：
在高放大倍率，膠體粒子顯示不全的牛頓 環(huán)出現(xiàn)照明不均。
解決方案：冷凝器可能是偏離中心。切換到低功耗的目標(biāo)和中心冷凝器。請(qǐng)仔細(xì)檢查，以確定是否在更高的功率目標(biāo)具有不同的中心，如果是的話，中心的目標(biāo)，以顯微鏡光軸。
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