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*是人類營養(yǎng)中zui重要的維生素之一,缺少它時會產(chǎn)生壞血病,因此又稱為抗壞血酸(ascorbic acid)。它對物質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)具有重要的作用。近年來,發(fā)現(xiàn)它還有增強(qiáng)機(jī)體對腫瘤的抵抗力,并具有化學(xué)致癌物的阻斷作用。
*主要存在于新鮮水果及蔬菜中。水果中以獼猴桃含量zui多,在檸檬、桔子和橙子中含量也非常豐富;蔬菜以辣椒中的含量zui豐富,在番茄、甘藍(lán)、蘿卜、青菜中含量也十分豐富,野生植物以刺梨中的含量zui豐富,每100克中含2800毫克,有“*王"之稱。
*為無色晶體,味酸,溶于水及乙醇,不耐熱,在堿性溶液中極不穩(wěn)定,日光照射后易被氧化破壞,有微量銅、鐵等重金屬離子存在時更易氧化分解,干燥條件下較為穩(wěn)定。故*制劑應(yīng)放在干燥、低溫和避光處保存;在烹調(diào)蔬菜時,不宜燒煮過度并應(yīng)避免接觸堿和銅器。
*具有很強(qiáng)的還原性。它可分為還原性和脫氫型。還原型抗壞血酸能還原染料 2,6-二氯酚靛酚(DCPIP),本身則氧化為脫氫型。在酸性溶液中,2,6-二氯酚靛酚呈紅色,還原后變?yōu)闊o色。因此,當(dāng)用此染料滴定含有*的酸性溶液時,*尚未全部被氧化前,則滴下的染料立即被還原成無色。一旦溶液中的*已全部被氧化時,則滴下的染料立即使溶液變成粉紅色。所以,當(dāng)溶液從無色變成微紅色時即表示溶液中的*剛剛?cè)勘谎趸?,此時即為滴定終點(diǎn)。
如無其它雜質(zhì)干擾,樣品提取液所還原的標(biāo)準(zhǔn)染料量與樣品中所含還原型抗壞血酸量成正比。
實驗試劑:
1. 2%草酸溶液: 草酸2g溶于100mL蒸餾水中。
2. 1%草酸溶液: 草酸1g溶于100mL蒸餾水中。
3. 標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液(1mg/mL): 準(zhǔn)確稱取100mg純抗壞血酸(應(yīng)為潔白色,如變?yōu)辄S色則不能用)溶于1%草酸溶液中,并稀釋至100mL,貯于棕色瓶中,冷藏。臨用前配制。
4. 0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液: 250mg 2,6-二氯酚靛酚溶于150mL含有52mg NaHCO3的熱水中,冷卻后加水稀釋至250mL,貯于棕色瓶中冷藏(4℃)約可保存一周。每次臨用時,以標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液標(biāo)定。
錨點(diǎn)實驗設(shè)備:
1. 錐形瓶100mL(′2)
2. 吸量管10mL(′1)
3. 容量瓶100mL(′1),250mL(′1)
4. 微量滴定管5mL(′1)
5. 研缽
6. 漏斗
7. 紗布實驗材料自選材料
實驗步驟:
1. 提取水洗干凈整株新鮮蔬菜或整個新鮮水果,用紗布或吸水紙吸干表面水分。然后稱取 20g,加入20mL 2%草酸,用研缽研磨,四層紗布過濾,濾液備用。紗布可用少量2%草酸洗幾次,合并濾液,濾液總體積定容至50mL。
2. 標(biāo)準(zhǔn)液滴定準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液1mL置100mL錐形瓶中,加9mL 1%草酸,用微量滴定管以0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡紅色,并保持15s不褪色,即達(dá)終點(diǎn)。由所用染料的體積計算出1mL染料相當(dāng)于多少毫克抗壞血酸(取10mL 1%草酸作空白對照,按以上方法滴定)。
3. 樣品滴定準(zhǔn)確吸取濾液兩份,每份10mL, 分別放入2個錐形瓶內(nèi),滴定方法同前。另取10mL 1%草酸作空白對照滴定。
4. 計算 式中:VA為滴定樣品所耗用的染料的平均毫升數(shù);VB為滴定空白對照所耗用的染料的平均毫升數(shù);C為樣品提取液的總毫升數(shù);D為滴定時所取的樣品提取液毫升數(shù);T為1mL染料能氧化抗壞血酸毫克數(shù)(由操作二計算出);W為待測樣品的重量(g)。
注意事項:
1. 某些水果、蔬菜(如橘子、西紅柿等)漿狀物泡沫太多,可加數(shù)滴丁醇或辛醇。
2. 整個操作過程要迅速,防止還原型抗壞血酸被氧化。滴定過程一般不超過2min。滴定所用的染料不應(yīng)小于1mL或多于4mL,如果樣品含*太高或太低時,可酌情增減樣液用量或改變提取液稀釋度。3. 提取的漿狀物如不易過濾,亦可離心,留取上清液進(jìn)行滴定。
*主要存在于新鮮水果及蔬菜中。水果中以獼猴桃含量zui多,在檸檬、桔子和橙子中含量也非常豐富;蔬菜以辣椒中的含量zui豐富,在番茄、甘藍(lán)、蘿卜、青菜中含量也十分豐富,野生植物以刺梨中的含量zui豐富,每100克中含2800毫克,有“*王"之稱。
*為無色晶體,味酸,溶于水及乙醇,不耐熱,在堿性溶液中極不穩(wěn)定,日光照射后易被氧化破壞,有微量銅、鐵等重金屬離子存在時更易氧化分解,干燥條件下較為穩(wěn)定。故*制劑應(yīng)放在干燥、低溫和避光處保存;在烹調(diào)蔬菜時,不宜燒煮過度并應(yīng)避免接觸堿和銅器。
*具有很強(qiáng)的還原性。它可分為還原性和脫氫型。還原型抗壞血酸能還原染料 2,6-二氯酚靛酚(DCPIP),本身則氧化為脫氫型。在酸性溶液中,2,6-二氯酚靛酚呈紅色,還原后變?yōu)闊o色。因此,當(dāng)用此染料滴定含有*的酸性溶液時,*尚未全部被氧化前,則滴下的染料立即被還原成無色。一旦溶液中的*已全部被氧化時,則滴下的染料立即使溶液變成粉紅色。所以,當(dāng)溶液從無色變成微紅色時即表示溶液中的*剛剛?cè)勘谎趸?,此時即為滴定終點(diǎn)。
如無其它雜質(zhì)干擾,樣品提取液所還原的標(biāo)準(zhǔn)染料量與樣品中所含還原型抗壞血酸量成正比。
實驗試劑:
1. 2%草酸溶液: 草酸2g溶于100mL蒸餾水中。
2. 1%草酸溶液: 草酸1g溶于100mL蒸餾水中。
3. 標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液(1mg/mL): 準(zhǔn)確稱取100mg純抗壞血酸(應(yīng)為潔白色,如變?yōu)辄S色則不能用)溶于1%草酸溶液中,并稀釋至100mL,貯于棕色瓶中,冷藏。臨用前配制。
4. 0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液: 250mg 2,6-二氯酚靛酚溶于150mL含有52mg NaHCO3的熱水中,冷卻后加水稀釋至250mL,貯于棕色瓶中冷藏(4℃)約可保存一周。每次臨用時,以標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液標(biāo)定。
錨點(diǎn)實驗設(shè)備:
1. 錐形瓶100mL(′2)
2. 吸量管10mL(′1)
3. 容量瓶100mL(′1),250mL(′1)
4. 微量滴定管5mL(′1)
5. 研缽
6. 漏斗
7. 紗布實驗材料自選材料
實驗步驟:
1. 提取水洗干凈整株新鮮蔬菜或整個新鮮水果,用紗布或吸水紙吸干表面水分。然后稱取 20g,加入20mL 2%草酸,用研缽研磨,四層紗布過濾,濾液備用。紗布可用少量2%草酸洗幾次,合并濾液,濾液總體積定容至50mL。
2. 標(biāo)準(zhǔn)液滴定準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸溶液1mL置100mL錐形瓶中,加9mL 1%草酸,用微量滴定管以0.1% 2,6-二氯酚靛酚溶液滴定至淡紅色,并保持15s不褪色,即達(dá)終點(diǎn)。由所用染料的體積計算出1mL染料相當(dāng)于多少毫克抗壞血酸(取10mL 1%草酸作空白對照,按以上方法滴定)。
3. 樣品滴定準(zhǔn)確吸取濾液兩份,每份10mL, 分別放入2個錐形瓶內(nèi),滴定方法同前。另取10mL 1%草酸作空白對照滴定。
4. 計算 式中:VA為滴定樣品所耗用的染料的平均毫升數(shù);VB為滴定空白對照所耗用的染料的平均毫升數(shù);C為樣品提取液的總毫升數(shù);D為滴定時所取的樣品提取液毫升數(shù);T為1mL染料能氧化抗壞血酸毫克數(shù)(由操作二計算出);W為待測樣品的重量(g)。
注意事項:
1. 某些水果、蔬菜(如橘子、西紅柿等)漿狀物泡沫太多,可加數(shù)滴丁醇或辛醇。
2. 整個操作過程要迅速,防止還原型抗壞血酸被氧化。滴定過程一般不超過2min。滴定所用的染料不應(yīng)小于1mL或多于4mL,如果樣品含*太高或太低時,可酌情增減樣液用量或改變提取液稀釋度。3. 提取的漿狀物如不易過濾,亦可離心,留取上清液進(jìn)行滴定。
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