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培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)有哪些值得注意的小技巧呢,一起來(lái)看看吧!
一、添加劑的添加
1.溫度的掌握:卵黃和抗生素類添加的溫度都不應(yīng)太高。
2.定量:過(guò)多會(huì)抑制一些目標(biāo)菌,太少又導(dǎo)致雜菌的過(guò)度生長(zhǎng)。
二、培養(yǎng)溫度的掌握
1.真菌類:25-28℃培養(yǎng)
2.細(xì)菌類:李氏菌在增菌和生化中要求培養(yǎng)溫度在30℃左右。
3.其他一般在36℃左右
三、接種方法
常用的方法主要有劃線、三點(diǎn)接種、穿刺接種、傾注接種、涂布接種、液體接種。
四、革蘭氏染色方法
染色時(shí)間的掌握、沖洗的方法。
五、劃線獲得單個(gè)菌落的方法,劃不出單個(gè)菌落的原因
1.平板上有過(guò)多的水分;
2.劃線時(shí)接種環(huán)未經(jīng)反復(fù)灼燒。
3.多區(qū)劃線,三區(qū)或四區(qū)劃線。
六、涂布和傾注的區(qū)別
1.涂布利于觀察,但由于涂布棒上會(huì)帶有少量的菌液,影響計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。
2.涂布更為準(zhǔn)確,但不利于觀察菌落的狀態(tài)。
七、培養(yǎng)基配制時(shí)應(yīng)注意的問(wèn)題
1.滅菌溫度要嚴(yán)格控制,按照要求滅菌,尤其含糖量較高的培養(yǎng)基溫度不應(yīng)太高,過(guò)高會(huì)導(dǎo)致糖分焦化,影響質(zhì)量。
2.瓊脂培養(yǎng)基不能反復(fù)溶化。反復(fù)溶化會(huì)破壞培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成分。
3.培養(yǎng)基不能反復(fù)滅菌,反復(fù)滅菌也會(huì)導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)成分的破壞。
4.含瓊脂的培養(yǎng)基滅菌后,要搖勻。
八、板的保存
大多數(shù)平板如VRBA、DC、尿素酶生化管、顯色系列等要避光低溫保存。
九、產(chǎn)品的保存
1.干粉培養(yǎng)基:避光干燥,結(jié)塊后不能使用。
2.亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等:冷凍保存,使用時(shí),要常溫解凍,避免水浴加熱。
3.抗生素類:冷藏保存,溫度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致靈敏度的下降。
4.兔血漿:冷藏保存少量的紅色不會(huì)影響結(jié)果。
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