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信帆現(xiàn)貨供應(yīng):甘油含量檢測(cè)試劑盒!
產(chǎn)品說(shuō)明:
甘油是甘油三酯的水解產(chǎn)物。脂蛋白酯酶能水解血液中的甘油三酯;胰脂酶可以水解食 物 中的甘油三酯;激素敏感脂肪分解酶能水解脂肪細(xì)胞中的甘油三酯。與游離脂肪酸一樣,甘油含量是甘油三酯水解反應(yīng)的可靠檢測(cè)指標(biāo),但檢測(cè)更方便。本試劑盒采用甘油磷酸氧化酶法和經(jīng)典GPO-Trinder 酶學(xué)反應(yīng)相結(jié)合的方法,通過(guò)比色法測(cè)定液體樣本中的甘油含量。經(jīng)過(guò)優(yōu)化后,操作步驟更加簡(jiǎn)單,檢測(cè)線性范圍在10-1200µmol/L,可靠性和重復(fù)性俱佳,適合生物醫(yī)學(xué)、食品實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)‘
檢測(cè)原理:
在ATP存在下甘油被甘油激酶磷酸化為3-磷酸甘油,再被甘油磷酸氧化酶氧化產(chǎn)生過(guò)氧化氫;在過(guò)氧化物酶作用下生色底物轉(zhuǎn)化為苯醌亞胺,其光密度值與甘油濃度成正比。
適用范圍:測(cè)定血液、細(xì)胞培養(yǎng)基、體液、酒類飲料中的甘油濃度。
所需設(shè)備:
酶標(biāo)儀、生化分析儀或721、722型可見(jiàn)光分光光度計(jì)。最加工作波長(zhǎng)550nm,如 無(wú)此波長(zhǎng)建議優(yōu)先選用570nm、次選530、490nm。
操作步驟:
一. 樣本處理:酒類、飲品、清澈液體樣本:可直接進(jìn)行測(cè)定,如超過(guò)線性范圍可用蒸餾水或生理鹽水稀釋后再測(cè)定。
培養(yǎng)液:取不含酚紅、無(wú)顏色、無(wú)血清的細(xì)胞培養(yǎng)基,如有細(xì)胞碎片應(yīng)4oC,,12,000g離心5min, 取上清進(jìn)行測(cè)定。
血液:新鮮抗凝血,4oC,2,000g 離心 5min 得到血漿;非抗凝血,先 4oC 靜置 2h 得到血清后, 2000g離心10min,除去血細(xì)胞。將得到的血漿/血清70oC 加熱10分鐘滅活內(nèi)源脂肪酶,12,000g 離 心 10min ,取上清測(cè)定或-20oC 保存。
二 .工作溶液配制:按4:1比例,取4 ml試劑R1與 1 ml 試劑 R2 混合,立即使用或 4oC 保存 <1天,變色棄去。
三 .標(biāo)準(zhǔn)品稀釋:用蒸餾水、生理鹽水或與樣品緩沖液一致的液體,將4mM甘油標(biāo)準(zhǔn)品倍比稀 釋為 1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125 µmol/L,通常取其中 4~6 管即可, 注意設(shè)置 0 濃度對(duì)照反應(yīng)管。
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