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更多> 高速逆流色譜是一種液-液色譜技術(shù),固定相與流動(dòng)相都是液體,不需要固態(tài)載體支撐。雖然這讓高速逆流色譜有了沒有不可逆吸附、無污染、樣品無損失等特點(diǎn),但是也讓固定相的液體在色譜柱中的保留程度對(duì)分離過程有非常大的影響。因此操作人員需要掌握影響固定相保留率的因素。固定相保留率的影響因素有以下幾點(diǎn):
1.溶劑體系
所選擇的溶劑體系對(duì)固定相保留率有很大的影響,如兩相密度差、粘度、界面張力等。通過研究表明,兩相的密度差對(duì)固定相保留率的影響大,固定相保留率和密度差基本呈線性關(guān)系。
2.螺旋管柱的轉(zhuǎn)速
螺旋管柱的轉(zhuǎn)速以及它產(chǎn)生的離心力場(chǎng)對(duì)兩相的混合程度具有決定性的影響。因此,對(duì)于界面張力較高的溶劑系統(tǒng),應(yīng)使用較高的轉(zhuǎn)速,以使兩相之間能夠劇烈的混合,從而促進(jìn)分配和減少質(zhì)點(diǎn)傳遞的阻力。對(duì)于界面張力較低的溶劑系統(tǒng),應(yīng)使用較低的轉(zhuǎn)速,以避免過分混合引起的乳化作用,以及固定相流失的問題。
3.流動(dòng)相流速方面
固定相保留率和流速平方根之間具有線性關(guān)系。
4.儀器的柱溫
儀器的柱溫對(duì)于親水性強(qiáng)的正丁醇溶劑體系的固定相保留率影響較大,升溫能改變?nèi)軇┑恼扯龋M(jìn)而影響兩相的分層時(shí)間。在50℃~60℃時(shí),正丁醇體系的分層時(shí)間短,在該溫度下可以改善固定相的保留率。然而,對(duì)于大部分的疏水性溶劑體系,由于兩相分層快,柱溫升高后兩相分層時(shí)間縮短不明顯,因而對(duì)改善保留率的效果不明顯。
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