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如何測(cè)量高濃度溶液的熒光光譜？

來(lái)源：日立分析儀器（上海）有限公司 2020年12月18日 16:58

　　1.前言

　　熒光分析法可用于物質(zhì)的定量和定性分析，而且靈敏度高，對(duì)于稀溶液來(lái)說(shuō)，熒光強(qiáng)度和樣品濃度成線(xiàn)性關(guān)系。那么如何準(zhǔn)確測(cè)量高濃度的溶液樣品呢？

　　圖1和圖2分別是使用10mm矩形樣品池+標(biāo)準(zhǔn)樣品池支架和10mm矩形樣品池+固體樣品支架的測(cè)定示意圖。

　　圖1 10mm矩形樣品池+標(biāo)準(zhǔn)樣品池支架

　　圖2 10mm矩形樣品池+固體樣品支架

　　從圖中可以看出，使用圖1的方式測(cè)量高濃度樣品時(shí)，激發(fā)光無(wú)法到達(dá)樣品內(nèi)部，并且在液體表面更容易產(chǎn)生熒光，這種現(xiàn)象被稱(chēng)為自吸收。由于樣品本身對(duì)熒光的吸收，造成更短波長(zhǎng)處的熒光消失。如果稀釋樣品不合適，則需要選用圖2的方式測(cè)量高濃度樣品，通過(guò)使用固體樣品支架，捕捉樣品表面的熒光。

　　2.在此實(shí)驗(yàn)中，我們測(cè)量了市售橄欖油和初榨橄欖油的三維熒光光譜，并比較了熒光強(qiáng)度。

　　樣品：不同濃度的橄欖油

　　測(cè)量附件：固體樣品支架

　　測(cè)量結(jié)果：四種樣品的三維熒光光譜

　　圖3 品牌A橄欖油的三維熒光光譜

　　圖4 品牌A初榨橄欖油的三維熒光光譜

　　圖5 品牌B橄欖油的三維熒光光譜

　　圖6 品牌B初榨橄欖油的三維熒光光譜

　　使用日立熒光分光光度計(jì)F-7100以60000nm/min的掃描速度，獲得了多個(gè)樣品的高信噪比光譜。在所有測(cè)試的橄欖油三維熒光光譜中，在兩個(gè)區(qū)域(i)、(ii)處觀察到熒光，計(jì)算(ii)/(i)的熒光強(qiáng)度比，可以看出，兩個(gè)品牌的初榨橄欖油與橄欖油相比，初榨橄欖油的強(qiáng)度比更高。

　　3.使用熒光分光光度計(jì)測(cè)量高濃度樣品溶液時(shí)，注意樣品自吸收對(duì)熒光光譜產(chǎn)生的影響。日立熒光分光光度計(jì)搭配固體樣品支架，以高通量測(cè)量了高濃度橄欖油的三維熒光光譜，測(cè)量結(jié)果準(zhǔn)確。

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