菌落總數(shù)測(cè)試片 菌落總數(shù)試劑盒
1 適用范圍:可用于各類食品及原料中菌落總數(shù)的測(cè)定。也可用于與食品接觸的容器、操作臺(tái)和其他設(shè)備表面的衛(wèi)生檢測(cè)。
2 方法原理:將營養(yǎng)培養(yǎng)基、凝膠和氯化三苯基四氮唑(TTC)顯色劑等加載在試紙片,經(jīng)加樣、培養(yǎng)后,細(xì)菌菌落在測(cè)試片上顯現(xiàn)出紅色菌斑,通過計(jì)數(shù)報(bào)告結(jié)果。
3 操作方法
3.1樣品處理:無菌稱取樣品25g(或25mL)放入含有225mL無菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯內(nèi),經(jīng)充分振搖(均質(zhì))做成1:10的稀釋液。用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL,注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內(nèi),用1mL滅菌吸管反復(fù)吸吹制成1:100的稀釋液。以此類推,做出1:1000等稀釋度的稀釋液,每個(gè)稀釋度更換一支滅菌吸管。
3.2接種:一般食品選2~3個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè),含菌量少的液體樣品(如食用純水和礦泉水等)可直接用原液檢測(cè)。將測(cè)試片放在水平臺(tái)面上,揭開上面的透明薄膜,用滅菌吸管吸取樣品原液或稀釋液1mL,均勻加到*的紙片上,輕輕將上蓋膜放下,靜置5 min使培養(yǎng)基凝固,zui后用手輕輕地壓一下。每個(gè)稀釋度接種兩片。
3.3培 養(yǎng): 將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中,透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi),堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃,培養(yǎng)15~24h。
4 結(jié)果判斷與計(jì)數(shù):
4.1細(xì)菌在紙片上生長后會(huì)顯示紅色斑點(diǎn),選擇菌落數(shù)適中(10個(gè)~100個(gè))的紙片進(jìn)行計(jì)數(shù),乘以稀釋倍數(shù)后即為每克(或毫升)樣品中所含的細(xì)菌菌落總數(shù)。菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí),按實(shí)有數(shù)報(bào)告。大于100時(shí),用二位有效數(shù)字,二位有效數(shù)字后面的數(shù)字,以四舍五入方法計(jì)算,并以10的指數(shù)來表示。
4.2計(jì)數(shù)原則與報(bào)告方式
4.2.1通常選擇菌落在10個(gè)~100個(gè)之間的紙片進(jìn)行計(jì)數(shù),乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之(見下表中例次1)。國家標(biāo)準(zhǔn)菌落總數(shù)報(bào)告方式術(shù)語為cfu/g或mL,cfu的含義為菌落形成單位。
4.2.2若有兩個(gè)稀釋度的菌落數(shù)在10個(gè)~100個(gè)之內(nèi),兩者的比值小于2,則取其平均數(shù),若大于2,則采用稀釋度小者報(bào)告(見下表中例次2和例次3)。
4.2.3若三個(gè)稀釋度的菌落數(shù)都有在10個(gè)~100個(gè)之內(nèi)時(shí),應(yīng)選擇二個(gè)低數(shù)值的平均數(shù)(見下表中例次4)。
4.2.4 若三個(gè)稀釋度的菌落數(shù)均小于10個(gè)或大于100個(gè)時(shí),應(yīng)重新試用更低或更高的稀釋度進(jìn)行菌落計(jì)數(shù);或采用均小于數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)的zui小值,或采用均大于數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)的zui大值(見下表中例次5和例次6)。
例次 | 稀釋度 | 兩稀釋 度之比 | 選定計(jì)數(shù) 稀釋度 | 報(bào)告方式 (個(gè)/g或 個(gè)/mL) |
10-1 | 10-2 | 10-3 |
1 2 3 4 5 6 | 158 208 265 98 8 295 | 76 68 82 50 5 174 | 5 12 50 15 1 106 | — 1.8 6.1 — — — | 10-2 10-2、10-3 10-2 10-1、10-2 10-1 10-3 | 7.6×103 9.4×103 8.2×103 3.0×103 8.0×10 1.1×105 |
5 表面取樣方法:加1mL滅菌生理鹽水在測(cè)試片上,靜置至少1h使培養(yǎng)基凝固;提起上層膜,使*濾紙部分貼到待測(cè)物表面,用手在外側(cè)輕壓;然后將上蓋膜合上,置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。
6 注意事項(xiàng):使用過的紙片上帶有活菌,需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理。
菌落數(shù)少時(shí)的情況 菌落數(shù)多時(shí)的情況
:李菲 :