基本原理:
聚合酶鏈反應(yīng)(Polymerase Chain Reaction ,簡(jiǎn)稱PCR)是80年代中期發(fā)展起來(lái)的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)。 它具有特異、敏感、產(chǎn)率高、 快速、 簡(jiǎn)便、重復(fù)性好、易自動(dòng)化等突出優(yōu)點(diǎn);能在一個(gè)試管內(nèi)將所要研究的目的基因或某一DNA片段于數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增至十萬(wàn)乃至百萬(wàn)倍,使肉眼能直接觀察和判斷;可從一根毛發(fā)、一滴血、甚至一個(gè)細(xì)胞中擴(kuò)增出足量的DNA供分析研究和檢測(cè)鑒定。
基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:
1、模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;
2、模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合;
3、引物的延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過(guò)程,就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈",而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2~4分鐘,2~3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍(Plateau)。到達(dá)平臺(tái)期所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1)該熱循環(huán)儀包含一個(gè)內(nèi)蓋系統(tǒng),帶有加熱器,高度可調(diào),為了*適用樣品的大小。可以防止樣品上部的冷凝;
2)該設(shè)備基于一個(gè)由連續(xù)電流控制的熱彈,由幾個(gè)珀?duì)柼?yīng)的熱電模塊,一個(gè)低熱阻散熱器和一個(gè)風(fēng)扇系統(tǒng)組成;
3)因?yàn)樗稍谕粋€(gè)塊上,該系統(tǒng)允許增加過(guò)程輸出及快速轉(zhuǎn)移和提取塊溫度,以zui短的時(shí)間從zui高溫度水平到zui低溫度水平;
4)強(qiáng)大的控制微處理器允許監(jiān)控任何時(shí)刻的過(guò)程,在屏幕上實(shí)時(shí)顯示圖像;
5)有一個(gè)有用的詳盡的軟件用于程序組織,通過(guò)鍵盤(pán)和一個(gè)高分辨率的液晶顯示屏訪問(wèn)。
可更換塊:
每個(gè)塊包含一個(gè)連接器,標(biāo)識(shí)它并允許熱循環(huán)以來(lái)識(shí)別它。還有一個(gè)提取器把手,使塊的支持使用更容易。
技術(shù)參數(shù):
1)有四個(gè)配適器模塊,用于0.2ml的小瓶、0.5ml的小瓶和孔;
2)溫度從0℃到99℃可調(diào);
3)持久性:100分鐘;
4)升溫速度:3℃/sec;
5)冷卻速度:2.8℃/sec;
6)均一性:95℃時(shí),±0.4℃;從20℃到75℃,±0.2℃;
7)精度:±0.2℃;
8)編程梯度:從2℃到30℃,根據(jù)程序;
9)加熱器蓋:從70℃到115℃,根據(jù)程序;
10)zui大循環(huán)數(shù):99;
11)儲(chǔ)存程序:多達(dá)99個(gè);
12)圖形顯示:14.5厘米,320 x240像素;
13)USB輸出;