概述
BD FACSARIA III
BD FACSAria™ III 流式細(xì)胞儀具有諸多的技術(shù)，多色性能出色，其簡便易用也為更多的科研工作者打開了復(fù)雜的細(xì)胞分析的大門，成為流式的傳奇制作。其精心設(shè)計(jì)的液流和光路系統(tǒng)，實(shí)現(xiàn)了信號檢測的最da化。光膠耦合石英流動池以及八角形、三角形光路收集系統(tǒng)，整個(gè)系統(tǒng)具有超高的靈敏度和分辨率。
特點(diǎn)
液流系統(tǒng)
多色分析及分選性能
BD FACSAria™ III細(xì)胞儀的液流系統(tǒng)是由壓力驅(qū)動的。正向空氣壓力使樣本細(xì)胞通過光膠藕合的石英杯流動池。在流體力學(xué)的聚焦作用下，樣本顆粒形成單一液流通過流動池，在流動池中，激光束與樣本流正交。
光膠耦合的石英杯流動池
BD FACSAria III的核心部位是石英杯流動池，她與激光器以及光膠耦合的熒光收集光路一起構(gòu)成了一套真正的穩(wěn)定性光路系統(tǒng)。為了得到更高的靈敏度，BD FACSAria III安裝了最新一代石英杯流動池。它的設(shè)計(jì)幫助確保激光正好聚焦到樣本流上，這樣就可以產(chǎn)生zui強(qiáng)的信號，并收集到最多量的光信號。
穩(wěn)定性光路使開機(jī)啟動時(shí)間最短，并提高實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性，可以自動化進(jìn)行每日質(zhì)控。更重要的是，它也提高了光信號收集效率，信號分辨率更好，特別適合多色應(yīng)用的需求，甚至在高速分選時(shí)同樣具有光信號的高靈敏度和分辨率。
廣受贊譽(yù)的可靠性和易操作性是該系統(tǒng)的特性
除其他功能外，BD FACSAria III中最新一代流動池的設(shè)計(jì)進(jìn)一步提高了側(cè)群細(xì)胞和細(xì)胞DNA周期分析的分辨率。
高性能分析，高性能分選
FACSAria III的分析性能，靈敏度，與最xin技術(shù)水平的分析型儀器的性能等同。這是因?yàn)槠溥\(yùn)用了與BD FACSCanto™ II和BD LSRFortessa™相同的光膠耦合流動池設(shè)計(jì)和穩(wěn)定性光路結(jié)構(gòu)。
這種設(shè)計(jì)的光學(xué)結(jié)構(gòu)可以達(dá)到高數(shù)值孔徑光學(xué)收集。流動池和噴嘴的設(shè)計(jì)能夠使顆粒在分析區(qū)域降低流速以便收集最多光信號，之后顆粒在通過噴嘴后在液流中加速，從而進(jìn)行高性能細(xì)胞分選。
由于BD FACSAria III光學(xué)和液流系統(tǒng)的精密設(shè)計(jì)，與傳統(tǒng)的空氣激發(fā)系統(tǒng)在相同的分析和分選速度時(shí)進(jìn)行比較BD FACSAria III有更杰出光學(xué)檢測靈敏度。
噴嘴適應(yīng)不同大小的顆粒
不同尺寸的噴嘴使用戶分選不同大小的樣本顆粒。噴嘴有四種尺寸可選:70微米、 85微米、 100微米和130微米。改進(jìn)的噴嘴設(shè)計(jì)使得更換更為方便，且安裝位置精確，不會發(fā)生偏差。這意味著在每次插入噴嘴后，可以得到可重復(fù)的液滴形態(tài)，不需要重新調(diào)節(jié)儀器設(shè)置，使儀器具有可重復(fù)的設(shè)置和校正狀態(tài)。軟件中包括了不同噴嘴的特異分選設(shè)置，使壓力及分選設(shè)置與使用的噴嘴相匹配。
方便的無菌設(shè)置和清洗程序
液流系統(tǒng)的創(chuàng)新，如易于插拔的噴嘴，自動化的分選設(shè)置，易于更換的濾光片等，使儀器設(shè)置更為方便和快捷。液流設(shè)計(jì)的特點(diǎn)包括一體化閥門組合和簡易高效的液流管路。軟件向?qū)篃o菌分選設(shè)置更簡便和高效。此外，在樣本運(yùn)行后，樣本采集管內(nèi)外都會自動進(jìn)行沖洗，達(dá)到最小殘留，消除樣本間的交叉污染。
BD FACSAria III的四個(gè)獨(dú)立光斑
BD Accudrop技術(shù)簡化了液滴延遲時(shí)間的確定
BD FACS™ Accudrop技術(shù)幫助使用者可以看到正確的最佳液滴延遲值，而在以前，這是無法用肉眼實(shí)現(xiàn)的。軟件自動化操作，簡化了液滴延遲的確定。一旦液滴延遲時(shí)間被確定，系統(tǒng)會自動調(diào)節(jié)并維持恒定的斷點(diǎn)，此技術(shù)稱為Sweet Spot。如果遇到管路堵塞，系統(tǒng)將自動停止分選，并保護(hù)收集管。
顆粒經(jīng)過流動池后液流會加速通過噴嘴，并形成分選液滴。因?yàn)轭w粒的檢測在噴嘴上方，所以插入或移走噴嘴時(shí)，您都無需調(diào)整光路或液流。
光學(xué)特性
更高效的多色檢測
BD首chuang的在光學(xué)系統(tǒng)方面的革新設(shè)計(jì)能有效的最da化檢測信號，并在多色檢測中極大的提高每個(gè)顏色通道的靈敏度和分辨率。增強(qiáng)的靈敏度和分辨率意味著即便信號很弱的細(xì)胞群也可以輕易地被識別和分選。
光學(xué)系統(tǒng)方便優(yōu)化多色檢測和抗體組合的設(shè)計(jì)，以求達(dá)到最佳結(jié)果。用戶可以選擇照射樣本細(xì)胞的激發(fā)光波長，以及引導(dǎo)散射光和熒光信號通過特定的濾光片到達(dá)檢測器的收集光路。激發(fā)光和收集光路上的創(chuàng)新設(shè)計(jì)在減小激發(fā)光損失的同時(shí)，也顯著改善了信號收集效率，從而使每個(gè)樣本都能獲取得到良好的信號。
激發(fā)光路
激發(fā)光路的組成包括:多根引導(dǎo)光纖、固定波長的激光、光束整形裝置和消色差聚焦透鏡。各激光聚焦形成的光斑在空間上相互分離，并各自聚焦成形(9×65微米)。光斑聚焦越集中，熒光標(biāo)記的微粒通過激發(fā)點(diǎn)時(shí)產(chǎn)生的信號就越強(qiáng)。光膠耦合的熒光收集物鏡能最大限度的將發(fā)射光從檢測點(diǎn)傳遞給熒光收集光路。由于光路和樣本流均固定，儀器光路的正交狀態(tài)在不同實(shí)驗(yàn)、不同日期間一直保持不變。
杰出的靈敏度和分辨率
手動調(diào)校光路會因?yàn)槊看握{(diào)校狀態(tài)不同而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果有變化。而固定光路設(shè)計(jì)避免了這種問題，保證儀器光路穩(wěn)定，對實(shí)驗(yàn)結(jié)果不會有影響。
八角形檢測器中的光傳播路徑
收集光路
光纖將發(fā)射光從光膠耦合石英杯傳遞給檢測器接受裝置?；诎私切魏腿切卧O(shè)計(jì)的收集光路，能最大限度的檢測來自每個(gè)激光束照射點(diǎn)的信號，其原理是讓波長最長的光(光子能力最di)優(yōu)先透射進(jìn)入第一個(gè)光電倍增管(PMT)，并通過一系列的長通二色分光鏡將較短波長的光反射到下一個(gè)PMT下檢測器。
這一設(shè)計(jì)是根據(jù)光反射比光透射更有效率這一原理。熒光信號以反射的形式傳播到每一個(gè)PMT下檢測器，并在到達(dá)檢測器之前只通過2個(gè)濾片。因此可以在光信號損失最小的情況下完成熒光檢測。
裝置在每個(gè)PMT下檢測器之前的帶通濾鏡允許波長范圍內(nèi)的熒光被收集。更重要的是，這種排列簡化了光學(xué)陣列中濾鏡和分光鏡，濾光片更易更換，而且不需要任何校準(zhǔn)就可達(dá)到更強(qiáng)的信號強(qiáng)度。
精密的光學(xué)設(shè)計(jì)
BD FACSAria III光學(xué)系統(tǒng)方面的諸多革新設(shè)計(jì)，例如專li的光膠耦合石英杯、八角形檢測器和9×65μm大小的光斑，這些革新設(shè)計(jì)協(xié)同工作，以最大限度提高檢測靈敏度和分辨率。通過精密的設(shè)計(jì)產(chǎn)生出這樣一套更高效的光學(xué)系統(tǒng)，使得其能夠使用較低功率激光，無需通過單純提高激光器的功率來提升實(shí)驗(yàn)靈敏度和分辨率。而低功率激光又同時(shí)可以降低儀器運(yùn)作的總體費(fèi)用。
多色檢測
滿足當(dāng)前及未來需求
對于許多用戶而言，一臺gao端流式細(xì)胞儀的性能高低取決于其靈活性，而靈活性主要表現(xiàn)在能夠同時(shí)檢測的參數(shù)數(shù)量。BD FACSAria™ III可以支持六根激光器和四個(gè)獨(dú)立光斑。可選的激光器包括：633 nm, 561 nm, 488 nm, 445 nm, 405 nm和375nm。并具有同時(shí)進(jìn)行多達(dá)20個(gè)參數(shù)，18色的檢測能力，有著強(qiáng)大的靈活性。
可升級并向下兼容
用戶可以根據(jù)當(dāng)前和未來的需求以及預(yù)算情況來配置儀器。以后還可以通過升級服務(wù)來增加BD FACSAria III的激光器數(shù)量，以提升其能力。除此之外，BD FACSAria或者BD FACSAria II的用戶可以也通過升級服務(wù)獲得BD FACSAria III的新的功能。
方便日后升級，緊隨前沿技術(shù)
靈活設(shè)置你的 BD FACSAria III
最多同時(shí)安裝6個(gè)激光器，最高同時(shí)檢測18色，激光器可選:633, 561,488, 445, 405, 375 nm
更低的使用成本
與空氣中激發(fā)得分選方式相比，BD FACSAria III獨(dú)te高效的光學(xué)系統(tǒng)的設(shè)計(jì)使得使用成本降低。BD FACSAria III通過光纖來傳導(dǎo)固體激光器所發(fā)出的激光，從而實(shí)現(xiàn)了靈敏度和分辨率的最da化。
控制與分析
與其他BD流式細(xì)胞分析儀和分選儀完mei兼容
無論是BD FACSAria™ III的儀器設(shè)置、數(shù)據(jù)獲取或是數(shù)據(jù)分析，BD FACSDiva™軟件都能夠提供快捷有效的控制。BD FACSDiva軟件被廣泛地應(yīng)用于一系列BD的流式細(xì)胞分析和分選儀，包括BDFACSCant,和BD™ LSR系統(tǒng)等。研究者的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)更為靈活方便,可以將優(yōu)化好的實(shí)驗(yàn)條件和設(shè)置快速的轉(zhuǎn)移到另一平臺上。例如，分析實(shí)驗(yàn)的條件和設(shè)置可以輕松應(yīng)用于分選實(shí)驗(yàn)。
流式細(xì)胞儀的設(shè)置和追蹤
BD FACSDiva軟件具有儀器設(shè)置和追蹤(CS&T)功能，能夠幫助儀器完成基線設(shè)置，優(yōu)化儀器的靈敏度和熒光分辨率。從而大幅減少了由于操作者的主觀誤判帶來的結(jié)果錯(cuò)誤，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一致穩(wěn)定。它使得用戶可以在儀器連續(xù)穩(wěn)定的前提下快速完成特定實(shí)驗(yàn)的條件設(shè)置。儀器狀態(tài)追蹤功能會監(jiān)測一系列儀器設(shè)置的數(shù)值，并給出狀態(tài)報(bào)告，大大簡化了日常質(zhì)控的流程。Levey-Jennings圖譜可以幫助用戶了解他們的儀器狀態(tài)確定是否需要進(jìn)一步的維護(hù)處理。
流式細(xì)胞儀的設(shè)置和追蹤
分選前的快速簡單準(zhǔn)備：
1. 打開細(xì)胞儀
2. 開啟液流
3. 自動化完成儀器設(shè)置、質(zhì)控和液滴延遲優(yōu)化
4. 優(yōu)化樣品條件
5..分選開始
數(shù)據(jù)獲取和分析
BD FACSDiva軟件使得科研工作者能夠使用自動的數(shù)據(jù)獲取流程去完成多個(gè)數(shù)據(jù)的預(yù)覽和保存。軟件還能夠管理數(shù)據(jù)獲取模板、實(shí)驗(yàn)界面設(shè)計(jì)、以及補(bǔ)償程序，方便數(shù)據(jù)獲取。
為了高效便捷的分析，軟件提供了自動設(shè)門方式、用戶可選的圖形結(jié)構(gòu)和批處理功能。存儲的數(shù)據(jù)可以通過圖形、門、群體層級以及統(tǒng)計(jì)結(jié)果，在同一張BD FACSDiva工作表上實(shí)現(xiàn)完整分析。一旦整體工作表被保存，可以被用來分析同一實(shí)驗(yàn)中的多個(gè)樣本管數(shù)據(jù)，從而大大節(jié)省時(shí)間。有助于提高效率的方式還有：用戶自定義的批處理分析、自動化的設(shè)門調(diào)整、在分析不同數(shù)據(jù)間暫停、輸出統(tǒng)計(jì)結(jié)果、在進(jìn)到下一個(gè)數(shù)據(jù)文件前打印結(jié)果等等。
數(shù)字化電子系統(tǒng)
光膠耦合的石英杯流動室和電子處理系統(tǒng)協(xié)同作用下，每個(gè)檢測顆粒的信息最da化。電子采樣速率和顆粒在流動室中的流動速度精確匹配。每秒70,000個(gè)顆粒的上樣速度下，采集到的數(shù)據(jù)保證了線性度和精確性(見下圖)。
BD FACSAria III系統(tǒng)數(shù)據(jù)采集速率
