CARR®細(xì)胞回收及分離系統(tǒng)Centritech® 隨著生物工程的發(fā)展,大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)越來越成為生物制藥行業(yè)的一項(xiàng)重要技術(shù)。傳統(tǒng)的細(xì)胞懸浮培養(yǎng)具有操作簡便,工藝過程易于控制等優(yōu)點(diǎn),而使用微載體培養(yǎng)則可以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的高密度培養(yǎng)及貼壁細(xì)胞培養(yǎng)。灌注培養(yǎng)能夠在連續(xù)獲得產(chǎn)物的同時(shí)移除細(xì)胞生長增殖過程中產(chǎn)生的代謝廢物,提供一個(gè)更加良好的體外培養(yǎng)環(huán)境。 Centritech®細(xì)胞分離系統(tǒng),是細(xì)胞分離領(lǐng)域的一項(xiàng)革命。本系統(tǒng)在工藝過程中可以充當(dāng)三種角色:灌注系統(tǒng),終離心收獲系統(tǒng)和放大工藝中的接種系統(tǒng)。Centritech®同時(shí)可以部分除去生物反應(yīng)器中的死亡細(xì)胞,優(yōu)化細(xì)胞的生長環(huán)境。 將Centritech®與生物反應(yīng)器聯(lián)用可形成一種新型的灌注培養(yǎng)系統(tǒng),通過Centritech®的輕柔離心作用,可將細(xì)胞與含目的產(chǎn)物和細(xì)胞代謝產(chǎn)物的培養(yǎng)液(上清)連續(xù)分離,此上清液可轉(zhuǎn)入下游進(jìn)行有效物質(zhì)的進(jìn)一步純化,而細(xì)胞被輸送回反應(yīng)器繼續(xù)培養(yǎng)。如果有效產(chǎn)品是胞內(nèi)蛋白,則可連續(xù)地收獲細(xì)胞。使用Centritech®,可將細(xì)胞培養(yǎng)密度提高10到50倍,大大節(jié)約昂貴的細(xì)胞培養(yǎng)基,真正實(shí)現(xiàn)連續(xù)細(xì)胞培養(yǎng),并可縮小所需生物反應(yīng)器的規(guī)模,簡化操作。同時(shí),死亡細(xì)胞的去除,為細(xì)胞生長提供了一種更為健康的培養(yǎng)環(huán)境,保障高細(xì)胞活性。而代謝廢物及死亡細(xì)胞內(nèi)容物的減少,為下游的進(jìn)一步純化提供了更為便利的條件。 LAB Ⅲ則是其中處理量較小的一種,它可以與3-300升的發(fā)酵罐連用。Centritech®中所有的分離過程均在預(yù)先除菌處理過的一次性離心袋中進(jìn)行。利用小于200g的離心力,在很短的時(shí)間內(nèi)在袋中分離細(xì)胞。同時(shí)通過不同的出口位置及一個(gè)氣囊的分隔分別收集濃縮細(xì)胞和無細(xì)胞上清。
分離原理: 分離細(xì)胞和培養(yǎng)基是許多細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的基本操作,以便反復(fù)利用、獲得、洗滌、澄清或破碎細(xì)胞。大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞易碎且對(duì)剪切力敏感,如果用傳統(tǒng)的方式分離,如普通離心、微濾或旋轉(zhuǎn)過濾,會(huì)產(chǎn)生大量的死細(xì)胞。Centritech®采用特殊的輕柔式離心是專為處理動(dòng)物細(xì)胞而設(shè)計(jì)的,不會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生任何影響,保持高細(xì)胞活性。
分離過程: 分離是在一個(gè)一次性分離袋中完成。分離袋安裝在轉(zhuǎn)子內(nèi)壁與固定環(huán)之間的狹縫內(nèi)。分離開始后分離袋轉(zhuǎn)動(dòng),液體從內(nèi)袋底部進(jìn)入分離袋。在離心作用下活細(xì)胞較死細(xì)胞更快地向外壁移動(dòng),再滑向內(nèi)袋頂部并回到反應(yīng)器,死細(xì)胞與上清液從底部另一出口排除,或?qū)⒊ニ兰?xì)胞的清液輸入反應(yīng)器。 應(yīng)用: 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,在保護(hù)細(xì)胞活性不受影響下: ● 分離細(xì)胞和培養(yǎng)液 ● 從培養(yǎng)液中除去部分死亡細(xì)胞,改善細(xì)胞生長環(huán)境 ● 在生物反應(yīng)器中連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)輸出產(chǎn)物,特別適用于灌注系統(tǒng)。 ● 濃縮細(xì)胞,制備單克隆抗體
特點(diǎn): ● 操作簡單,易于安裝 ● 采用一次性無菌分離袋,大大降低污染幾率 ● 易于放大,大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)所用Centritech®系統(tǒng)與小規(guī)模系統(tǒng)除流速范圍更廣外,其它幾乎*一致 ● 一次性分離袋無須機(jī)械密封系統(tǒng),*泄漏及培養(yǎng)物的污染 ● 降低生產(chǎn)成本,提高生產(chǎn)率 |