HPCE512高效毛細(xì)管電泳儀
HPCE512
---展示毛細(xì)管電泳的非凡潛力
高效毛細(xì)管電泳的重大進(jìn)步
HPCE512系統(tǒng)基于多點(diǎn)檢測(cè),克服了常規(guī)毛細(xì)管電泳(CE)存在的問題。與其它毛細(xì)管電泳系統(tǒng)相比,該儀器在定量、分辨率、靈敏度和重復(fù)性等方面均有較大的提高。這一顯著優(yōu)勢(shì)是通過比競(jìng)爭(zhēng)系統(tǒng)收集更多的樣本數(shù)據(jù), 然后使用的信號(hào)處理算法來區(qū)分與分析物相關(guān)的信號(hào)和來自于背景的噪聲。
傳統(tǒng)CE系統(tǒng)的數(shù)據(jù)質(zhì)量往往很差。即使是相同的樣本,數(shù)據(jù)的重復(fù)性也很難達(dá)到要求。靈敏度被認(rèn)為是不夠的,除非使用昂貴的、費(fèi)時(shí)的標(biāo)記技術(shù),這些技術(shù)會(huì)對(duì)分析物的性質(zhì)產(chǎn)生不利的影響。HPCE512作為一種免標(biāo)記系統(tǒng),既可以減少分析成本,又可以解決常規(guī)CE的問題。
HPCE512以每秒10到15次的速度對(duì)512像素光電二極管陣列上的每個(gè)分析物帶進(jìn)行成像,因此,每個(gè)分子帶(在這個(gè)例子中是蛋白質(zhì))的傳輸在時(shí)間和距離上可以被追蹤。
追蹤分析物的直線斜率取決于分子的特性(例如分子量、所選操作模式的電荷/質(zhì)量)
直線度表示分離條件的保真度,所有不同蛋白質(zhì)的軌跡可回到一個(gè)共同的注射點(diǎn)或頂點(diǎn)。
軟件可以識(shí)別出與任何頂點(diǎn)軌跡不一致(紅色顯示)的信號(hào),并將其作為背景噪聲丟棄。
結(jié)果可以在背景干擾非常小的情況下對(duì)規(guī)定的峰進(jìn)行明確地分析。
這種處理方式不需要使用標(biāo)記化學(xué)品, 可實(shí)現(xiàn)高分辨率、可量化和可重復(fù)的分析。
更好的數(shù)據(jù)結(jié)果分辨率、重復(fù)性和定量準(zhǔn)確度
在HPCE512系統(tǒng)中使用的512像素光電二極管陣列檢測(cè)器,可以通過每次分析捕獲更大的數(shù)據(jù)量。
強(qiáng)大的信號(hào)處理算法可消除背景噪聲,使得每個(gè)組分都可以得到分離和量化。
氨基酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(Sigma A 6407)的EVA處理數(shù)據(jù)
高分辨率數(shù)據(jù)
案例—核糖核酸酶B及其5種糖型分析
圖像顯示了這種糖蛋白的毛細(xì)管凝膠電泳,分辨率<200Da(1 甘露糖=162Da),得到的數(shù)據(jù)結(jié)果可與一些形式的質(zhì)譜結(jié)果相媲美。
強(qiáng)大的數(shù)據(jù)處理算法可在小于200 道爾頓的分辨率下完美分析糖蛋白。
自診斷功能連續(xù)監(jiān)測(cè)毛細(xì)管和緩沖液條件
電滲流問題
熔融石英毛細(xì)管的表面存在硅羥基,這些硅羥基在常見電泳介質(zhì)的存在下被離子化并在常見的pH條件下帶上負(fù)電荷,從而形成雙電層,該雙電層即使在電場(chǎng)和具有大量陽離子的可移動(dòng)區(qū)域的影響下也不會(huì)移動(dòng)。在這個(gè)致密層之外,是一個(gè)中性電解液的擴(kuò)散層。
當(dāng)電位差作用于毛細(xì)管時(shí),可移動(dòng)層中的陽離子向陰極方向遷移。離子在電解質(zhì)中被溶劑化,因此大量電解質(zhì)緩沖液也向陰極方向移動(dòng)。這種流體的流動(dòng)被稱為電滲流(EOF),如果不通過多點(diǎn)檢測(cè)進(jìn)行監(jiān)控并通過毛細(xì)管調(diào)節(jié)進(jìn)行控制,則會(huì)導(dǎo)致數(shù)據(jù)質(zhì)量下降,尤其是數(shù)據(jù)的重復(fù)性不好。
HPCE方法
多點(diǎn)檢測(cè)允許在其信號(hào)處理算法中將基于空間和距離的數(shù)據(jù)集生成為等相位圖。然后可以將其用于每次運(yùn)行的檢查中,以查看毛細(xì)管中的條件是否已影響數(shù)據(jù)。通過觀察等相位圖中分析物譜帶或緩沖液成分的行為,可以監(jiān)控任何特定分離中的EOF。這樣可以優(yōu)化毛細(xì)管條件和其他參數(shù)(例如pH值、溫度、緩沖液等),從而在可重復(fù)性,分離度和定量方面產(chǎn)生明顯優(yōu)異的數(shù)據(jù)。
上面的圖片似乎表明該產(chǎn)品已降解,但是等相位圖顯示,是因?yàn)榉蛛x條件發(fā)生了變化
產(chǎn)品規(guī)格
物理特性: 尺寸:長(zhǎng)<700 mm;寬<500 mm;高<500 mm 重量:<50 kg 樣品處理: 進(jìn)樣系統(tǒng):左右雙轉(zhuǎn)盤,一個(gè)入口轉(zhuǎn)盤和一個(gè)出口轉(zhuǎn)盤,兩個(gè)方向均可 運(yùn)行分析 轉(zhuǎn)盤樣品瓶數(shù):每個(gè)樣品盤24個(gè) 進(jìn)樣方式:氣體壓力進(jìn)樣或電進(jìn)樣 毛細(xì)管制冷方式:帕爾貼控溫 電氣要求: 毛細(xì)管電壓范圍(雙極):0-±28KV 標(biāo)配波長(zhǎng)214nm、254nm和280nm 電壓要求:85-264 VAC 50/60 Hz 電源要求:<750 W 操作要求: 溫度:14-30℃ 濕度:0 - 90%(無空調(diào)要求) 可選附件: 樣品和緩沖液冷卻系統(tǒng):10-40℃ |
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標(biāo)簽:HPCE512高效毛細(xì)管電泳儀