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產(chǎn)品名稱: DNA堿性轉(zhuǎn)移緩沖液
規(guī)格:500ml
用途:DNA堿轉(zhuǎn)移至尼龍膜
注意事項(xiàng):
儲(chǔ)存條件:室溫,12個(gè)月
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真核基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn):
1.轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順?lè)醋?真核基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物一般是單順?lè)醋?mono-cistron),即一個(gè)編碼基因轉(zhuǎn)錄生成一個(gè)mRNA分子,并指導(dǎo)翻譯一條多肽鏈。
2.大量重復(fù)序列:真核基因組中含大量的重復(fù)序列,這些重復(fù)序列大部分是沒(méi)有特定生物學(xué)功能的DNA 片段,可占整個(gè)基因組DNA的90%。根據(jù)重復(fù)頻率可將其分為高度重復(fù)序列、中度重復(fù)序列和單拷貝序列。
3.斷裂基因:真核生物中的基因具有不連續(xù)性,即一個(gè)基因的編碼序列往往被一些非編碼序列分隔開(kāi)。基因中能夠轉(zhuǎn)錄并進(jìn)一步編碼多肽鏈合成的部分稱為外顯子(exon),而在轉(zhuǎn)錄后會(huì)被剪除的部分則稱為內(nèi)含子(intron)。                                                                 真核基因表達(dá)調(diào)控的特點(diǎn):
1.RNA聚合酶活性受轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控:真核生物中存在RNA polⅠ、Ⅱ、Ⅲ三種不同的RNA聚合酶,分別負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄不同的RNA。這些RNA聚合酶與相應(yīng)的轉(zhuǎn)錄因子形成復(fù)合體,從而激活或抑制該酶的催化活性。
2.染色質(zhì)結(jié)構(gòu)改變參與基因表達(dá)的調(diào)控:真核生物DNA與組蛋白結(jié)合并形成核小體的結(jié)構(gòu),再進(jìn)一步形成染色質(zhì)。當(dāng)真核基因被激活時(shí),染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)也隨之發(fā)生改變。主要的改變有:
⑴單鏈DNA形成:基因被激活后,雙鏈DNA解開(kāi)成單鏈以利于轉(zhuǎn)錄,從而形成一些對(duì)DNAaseⅠ的超敏位點(diǎn)。
⑵DNA拓樸結(jié)構(gòu)改變:天然雙鏈DNA均以負(fù)性超螺旋構(gòu)象存在,當(dāng)基因激活后,則轉(zhuǎn)錄區(qū)前方的DNA拓樸結(jié)構(gòu)變?yōu)檎猿菪U猿菪勺璧K核小體形成,并促進(jìn)組蛋白解聚。
⑶核小體不穩(wěn)定性增加:由于組蛋白修飾狀態(tài)改變,巰基暴露等原因而引起核小體結(jié)構(gòu)改變。
4.正性調(diào)節(jié)占主導(dǎo):真核基因一般都處于阻遏狀態(tài),RNA聚合酶對(duì)啟動(dòng)子的親和力很低。通過(guò)利用各種轉(zhuǎn)錄因子正性激活RNA聚合酶是真核基因調(diào)控的主要機(jī)制。
5.轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程分別進(jìn)行:轉(zhuǎn)錄與翻譯過(guò)程分別存在于不同的亞細(xì)胞部位,可分別進(jìn)行調(diào)控。
6.轉(zhuǎn)錄后加工修飾過(guò)程復(fù)雜:特別是mRNA,轉(zhuǎn)錄后僅形成其初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物——HnRNA,然后再經(jīng)剪接、加帽、加尾等加工修飾,才能轉(zhuǎn)變?yōu)槌墒斓膍RNA。
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