β2微球蛋白檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
ELISA操作顯色過(guò)程常見(jiàn)問(wèn)題及解答:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 使用變質(zhì)的顯色劑。
3) 未使用完畢的顯色劑返回原瓶造成污染
4) 顯色反應(yīng)不避光,或有陽(yáng)光直射
解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用;
2) A、B 液應(yīng)避免接觸金屬器械。
3) 使用量根據(jù)樣本需要量取,取出后未使用完畢的顯色液應(yīng)棄去,不能再次返回原試劑瓶,以免造成顯色液污染,影響下次使用;
4) TMB對(duì)光敏感,一般顯色反應(yīng)要避光進(jìn)行
通用名稱:β2微球蛋白檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名稱:β2-Microglobulin ELISA
產(chǎn)品貨號(hào):EIA1789
產(chǎn)品規(guī)格:96T
檢測(cè)樣本:血清
公司品牌:德國(guó)DRG
儲(chǔ)存條件:2-8℃
檢測(cè)方法:ELISA方法
預(yù)期用途:用于人類血清中β2微球蛋白的體外定量檢測(cè)
參考價(jià)格:詢價(jià)
供應(yīng)商家:深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司
β2微球蛋白ELISA試劑盒預(yù)期用途
β2微球蛋白檢測(cè)試劑盒用于人類血清中β2微球蛋白的體外定量檢測(cè)。
β2微球蛋白前言簡(jiǎn)介
β2微球蛋白(β2-MG)由人體有核細(xì)胞和許多腫瘤細(xì)胞系表達(dá)。人類β2微球蛋白是一種低分子量蛋白質(zhì)(MW11600),由99個(gè)氨基酸組成的多肽單鏈。它是與人類白細(xì)胞抗原HLA-A,-B,-C主要組織相容性復(fù)合體抗原的輕鏈相同。在結(jié)構(gòu)和氨基酸序列上,與IgG的CH3區(qū)域相似,雖然抗原性有區(qū)別。
β2微球蛋白通過(guò)腎臟代謝。在通過(guò)腎小球過(guò)濾后,由近端腎小管細(xì)胞通過(guò)內(nèi)吞作用重吸收和分解。在正常個(gè)體的血清和尿液中β2微球蛋白的量很低。通常只有微量的β2微球蛋白通過(guò)尿液排泄,尿排泄量升高被解釋為腎小管功能障礙的證據(jù)。腎小管間質(zhì)性疾病和存在氨基糖苷類抗生素和抗炎藥物聯(lián)用時(shí)β2微球蛋白尿排泄量會(huì)顯著的增加。
β2微球蛋白在上泌尿道感染和結(jié)締組織?。ㄈ纾侯愶L(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)以及休格林氏癥綜合癥的病人尿液里排泄量也會(huì)增加。在正常腎小球過(guò)濾率,血清中β2微球蛋白濃度升高提示β2微球蛋白的產(chǎn)生或釋放增強(qiáng)。在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎,系統(tǒng)性紅斑狼瘡,結(jié)節(jié)病和一些病毒性疾病包括巨細(xì)胞病毒,非A型和非B型肝炎和感染性單核細(xì)胞增多癥的患者中,β2-MG血清水平與疾病活動(dòng)有關(guān)。
β2-MG ELISA提供了一種靈敏可靠的測(cè)定人血清中β2-微球蛋白的測(cè)定方法。該試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)品范圍為0.625至10μg/ mL,將確定0.1μg/ mL的小可檢測(cè)濃度。該實(shí)驗(yàn)2小時(shí)內(nèi)可出結(jié)果。
β2微球蛋白ELISA試劑盒組成成分
●抗體包被板,96(孔),微孔中包被了鼠單克隆抗β2-MG抗體。
●酶聯(lián)物,22ml,含辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗β2-MG抗體。
●標(biāo)準(zhǔn)品,6瓶,凍干粉,101倍預(yù)稀釋后,含β2-MG抗體的濃度分別為:0,0.625,1.25,2.5,5,10ug/ml。
●*,100ml,2% BSA緩沖液,含有防腐劑。
●TMB底物液,11ml,含穩(wěn)定的3,3,,5,5,,-四甲基聯(lián)本胺(TMB)緩沖液。
●終止液(1N HCL),11ml,含*。
β2微球蛋白檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理
β2-MG ELISA測(cè)試是基于固相酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)的原理。實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)利用單克隆抗β2微球蛋白抗體固相固定(微孔中)。羊抗β2微球蛋白抗體結(jié)合到酶(辣根過(guò)氧化物酶)標(biāo)記物上。稀釋的測(cè)試樣本在37℃時(shí)先和固相抗體反應(yīng)30分鐘。然后加入羊抗-β2-MG-HRPO結(jié)合物37℃反應(yīng)30分鐘,使β2-MG分子夾在固相載體和酶標(biāo)抗體之間。
洗板以去除未結(jié)合的酶標(biāo)抗體,加入TMB溶液在室溫下溫育20分鐘,使溶液變?yōu)樗{(lán)色。加入終止液(1N HCL)停止顏色反應(yīng),顏色變?yōu)辄S色。
試驗(yàn)樣本β2-MG濃度和顏色強(qiáng)度成正比,吸光值在450nm處測(cè)量。
β2微球蛋白檢測(cè)試劑盒儲(chǔ)存條件
●未開(kāi)封試劑盒在2~8℃儲(chǔ)存至有效期,有效期參考包裝標(biāo)簽。
●已開(kāi)封試劑在2~8℃儲(chǔ)存恰當(dāng)可穩(wěn)定至有效期。
●保持微孔板在含有干燥劑的密封袋里,以減少暴露于潮濕的空氣中。
β2微球蛋白檢測(cè)試劑盒檢測(cè)步驟
●將所需數(shù)量的包被孔固定到板架上。
●將20ul的標(biāo)準(zhǔn)品、稀釋樣本和稀釋質(zhì)控加到相應(yīng)的孔中。
●每孔加入200ul**的混勻30秒。*混勻非常重要。
●37℃溫育30分鐘。
●倒出孔內(nèi)混合物并用去離子水或蒸餾水洗板5次(不能用自來(lái)水)。并在吸水紙上拍干。
●每孔加200ul酶聯(lián)物,輕輕的混勻10秒。
●37℃溫育30分鐘。
●重復(fù)步驟5.
●每孔加入100ul TMB底物液,輕輕混勻10秒。
●室溫避光溫育20分鐘。
●通過(guò)每孔加入100ul終止液終止反應(yīng)。
●輕輕混勻10秒,這步非常重要確保所有的藍(lán)色*的變成黃色。
●15分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀(450nm)讀數(shù)。
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