磷脂IgA篩查試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
問(wèn):ELISA操作的方法有些?
答:ELISA的操作方法有捕獲法、間接法、競(jìng)爭(zhēng)法、雙抗原夾心法和雙抗體夾心法。
通用名稱:磷脂IgA篩查試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
英文名稱:Phospholipid IgA Screen ELISA
產(chǎn)品貨號(hào):RE70421
產(chǎn)品規(guī)格:96T
檢測(cè)樣本:血清
公司品牌:德國(guó)IBL
儲(chǔ)存條件:2-8℃
檢測(cè)方法:ELISA方法
預(yù)期用途:用于組合定性和定量檢測(cè)人血清中磷脂的IgA抗體
參考價(jià)格:詢價(jià)
供應(yīng)商家:深圳市科潤(rùn)達(dá)生物工程有限公司
磷脂IgA檢測(cè)試劑盒預(yù)期用途
磷脂IgA篩查試劑盒用于組合定性和定量檢測(cè)人血清中磷脂的IgA抗體。該測(cè)定是系統(tǒng)性紅斑狼瘡和抗磷脂綜合征(APS)患者血栓形成診斷和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的輔助工具。
磷脂前言介紹
針對(duì)磷脂,生物膜組分的抗體對(duì)磷脂如心磷脂,磷脂酰肌醇,乙存胺,*,鞘磷脂和磷脂酸是特異性的。系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清常發(fā)現(xiàn)抗磷脂抗體紅斑狼瘡(SLE)和相關(guān)疾病。 在患有SLE和相關(guān)疾病的患者中發(fā)生抗磷脂抗體是二次抗磷脂綜合征(APS)的典型。 相比之下,沒(méi)有其他自身免疫性疾病的患者中的抗磷脂抗體是主要APS的特征。許多研究表明,這些自身抗體與血栓形成,血小板減少癥和習(xí)慣性流產(chǎn)的發(fā)生率(胎盤(pán)梗死的結(jié)果)增強(qiáng)相關(guān)。 致病性抗磷脂抗體誘導(dǎo)血栓形成的確切機(jī)制尚未*揭示。
磷脂IgA檢測(cè)試劑盒檢測(cè)原理
用1:10稀釋的血清樣品在包被特異抗原的微孔板中孵育。 患者的抗體(如果存在于標(biāo)本中)與抗原結(jié)合。 在隨后的步驟中將未結(jié)合的物質(zhì)洗掉。 之后辣根過(guò)氧化物酶(綴合物)綴合的抗*與微量培養(yǎng)板中樣品的抗原 - 抗體復(fù)合物反應(yīng)。未結(jié)合的共軛物在隨后的步驟中洗掉。 添加TMB底物產(chǎn)生一個(gè)酶促比色(藍(lán)色)反應(yīng),其被稀釋的酸停止(顏色變化到黃色)。 來(lái)自底物的顏色形成的強(qiáng)度是其中的一種與抗原 - 抗體復(fù)合物結(jié)合的綴合物的量,并且這與患者樣品中各抗體的初始濃度成比例。
磷脂IgA篩查試劑盒組成成分
●微孔板——12×8孔——每孔用高度純化的牛心磷脂,β2-糖蛋白I,磷脂酰*,肌醇,乙存胺,*和鞘磷脂包被。
●陰性質(zhì)控品——1×1.5ml——綠蓋,無(wú)色,含人血清,BSA ,防腐劑
●陽(yáng)性質(zhì)控品——1×1.5ml——紅蓋,黃色,含人血清,BSA ,防腐劑
●臨界標(biāo)準(zhǔn)品——1×1.5ml——藍(lán)蓋,黃色,含人血清,BSA ,防腐劑
●標(biāo)準(zhǔn)品——6×1.5ml——白蓋,黃色,標(biāo)準(zhǔn)品濃度分別為:0,3,10,30,100,300U/ml,含人血清,BSA ,防腐劑。
●酶聯(lián)物 IgA——1×15ml——紅蓋,紅色,含HRP標(biāo)記的抗*,BSA等
●TMB底物液——1×15ml——黑蓋,無(wú)色,內(nèi)含TMB及H2O2。
●終止液——1×15ml——白蓋,無(wú)色,內(nèi)含1M的鹽酸,
●洗滌液(50X)——1×20ml——50倍濃縮,白蓋,綠色,含tris.Nacl,tw-20,防腐劑
●稀釋液(5X)——1×20ml——5倍濃縮,白蓋,黃色,含tris.Nacl,BSA,防腐劑
磷脂IgA篩查試劑盒儲(chǔ)存條件
磷脂IgA篩查試劑盒應(yīng)當(dāng)2~8℃的環(huán)境下儲(chǔ)存。一旦開(kāi)封,重組的各試劑在2-8℃可保存一個(gè)月,磷脂IgA篩查試劑盒酶標(biāo)板應(yīng)在各自標(biāo)識(shí)的日期內(nèi)使用,TMB溶液應(yīng)避光。微孔板條一但被拆開(kāi),應(yīng)當(dāng)將其重新密封好,并加入干燥劑。
磷脂IgA篩查試劑盒檢測(cè)步驟
●準(zhǔn)備好所需試劑。
●根據(jù)需要選擇定性或定量檢測(cè)。
●定性檢測(cè):每孔加入100ul陰性質(zhì)控,臨界質(zhì)控,陽(yáng)性質(zhì)控和樣本;定量檢測(cè),每孔加入100ul標(biāo)準(zhǔn)品A-F,陰性質(zhì)控,陽(yáng)性質(zhì)控和樣本。
●20-32℃溫育30分鐘。
●每孔用300μl洗滌液洗板3次(注意:洗板步驟是否操作正確會(huì)明顯影響實(shí)驗(yàn)的靈敏度和精密度。
●在每一微孔中加入100μl酶聯(lián)物。
●20-32℃溫育30分鐘。
●每孔用300μl洗滌液洗板3次。
●在每一微孔加TMB底物液100μl。
●20-32℃溫育30分鐘,避免陽(yáng)光直射。
●按底物加入非順序,每孔加100μl終止液以終止底物反應(yīng)。
●至少孵育5s,并輕輕混勻
●加終止液后30min內(nèi)在450nm讀取OD值。(參照波長(zhǎng):620nm)
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