Thermo NanoDropone超微量分光光度計(jì)
是NanoDrop的新產(chǎn)品,應(yīng)用液體的表面張力特性,樣品體積只需要 0.5~2ul,在檢測(cè)臺(tái)上,經(jīng)上下臂的接觸拉出固定的光徑達(dá)到快速、微量、高濃度、免石英管、免毛細(xì)管等耗材檢測(cè)吸收值的優(yōu)點(diǎn)。此產(chǎn)品設(shè)計(jì)受保護(hù),并在*廣受歡迎,其準(zhǔn)確度與便利性讓科學(xué)家得以更有效率進(jìn)行各項(xiàng)研究。
Thermo NanoDrop one超微量分光光度計(jì)使用高能量氙燈(pulsed xenon flash lamp)可提供190~840nm的全光譜檢測(cè),且不需要暖機(jī),開機(jī)后立即使用。搭配高感度CCD array檢測(cè)器,檢測(cè)吸收值可高達(dá)300Abs(dsDNA濃度2~15000ng/ul),大部分純化后的核酸幾乎都不需要稀釋即可檢測(cè)。
待測(cè)樣品的均質(zhì)性是的高要求,一般核酸、蛋白質(zhì)樣品能在檢測(cè)前以vortex mixer震勻?yàn)閔ao,若無vortex mixer也應(yīng)以pipette吸放數(shù)次混勻。若擔(dān)心genomic DNA可能因前述動(dòng)作而斷裂,則改以55?C加熱約一分鐘,使樣品在偵測(cè)前呈現(xiàn)均勻狀態(tài),以確保 2ul 具有代表性。
Thermo NanoDropone超微量分光光度計(jì)
檢測(cè)時(shí)選擇不同檢測(cè)模式,可以得到快速的結(jié)果:
● Nucleic Acid – 吸收光譜、230nm, 260nm, 280nm吸收值(換算成10mm光徑吸收值)、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸濃度。
● UV-Vis – 190~840nm間所有波長(zhǎng)的吸收值及光譜(以1mm光徑吸收值呈現(xiàn))。
● A280蛋白質(zhì)定量法 – 280nm吸收值(換算成10mm光徑吸收值)、260/280 ratio及蛋白質(zhì)濃度。僅適用于純化后的蛋白質(zhì),須具有已知的質(zhì)量消光系數(shù)(mass extinction coefficient)方可計(jì)算。
● BCA、Bradford及Lowry – 依不同呈色劑提供不同波長(zhǎng)吸收值結(jié)果,自動(dòng)畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算R square,待測(cè)蛋白質(zhì)濃度。
* 蛋白質(zhì)檢測(cè)模式目前提供BCA、Bradford及Lowry三種常見定量呈色劑,因呈色劑隨時(shí)間會(huì)逐漸加深,使用前請(qǐng)?jiān)旈喸噭┱f明書并制備不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,在kuai時(shí)間內(nèi)完成檢測(cè),以得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線多可有七個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品,每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品多可做五重復(fù)。
* 測(cè)蛋白質(zhì)時(shí)樣品體積需使用 2ul,每個(gè)樣品檢測(cè)后需以Kimwipes 低塵擦拭紙(編號(hào): 34155 )擦拭15~20回,以避免呈色劑與蛋白質(zhì)的殘留。
1、 光譜范圍廣 (190-850 nm),適合多種樣品類型的測(cè)量:
多肽 (205 nm)、DNA和RNA (260 nm)、純化蛋白質(zhì) (280 nm)、 毒理學(xué)測(cè)定和工業(yè)染料 (490 nm)、金納米粒(520 nm)、比色法蛋白質(zhì)測(cè)定(BCA 562 nm、Bradford 595 nm、改進(jìn)的 Lowry650nm、Pierce 660 660nm)、 光密度測(cè)量 (600 nm)
2、將具有技術(shù)的樣品保留系統(tǒng)與比色皿測(cè)定能力相結(jié)合,實(shí)現(xiàn)對(duì)低濃度和高濃度樣品的兼容性(2.0 - 27,500 ng/μL dsDNA 及 0.06 - 820 mg/mL BSA)
4、計(jì)算樣品純度比值(A260/A280 nm 及 A260/A230 nm)
5、針對(duì) DNA、蛋白質(zhì) A280、微陣列、蛋白質(zhì)和標(biāo)簽(標(biāo)簽可改為標(biāo)記)、Pierce 660、Bradford、BCA 以及 Lowry 設(shè)定了預(yù)配置方法,包括自定義方法和數(shù)據(jù)導(dǎo)出功能的用戶友好軟件。