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96T F10301 mouse sCD40L ELISA試劑盒

參考價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海西唐生物科技有限公司
  • 品牌
  • 型號(hào) 96T
  • 所在地 上海市
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間 2018/5/17 14:43:30
  • 訪問(wèn)次數(shù) 166

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免疫印跡(western blot)技術(shù)服務(wù)
    
◇樣本制備   
    1. 懸浮細(xì)胞:取大約 1×107個(gè)細(xì)胞,低速離心收集,棄去培養(yǎng)液,加入1ml PBS懸浮細(xì)胞,轉(zhuǎn)入小離心管中,低
速離心沉淀細(xì)胞,棄去PBS,放入-70℃ 冰箱保存。  
    2. 貼壁細(xì)胞:取大約1×107個(gè)貼壁細(xì)胞,*消化后加入PBS懸浮細(xì)胞,轉(zhuǎn)入小離心管中,低速離心沉淀細(xì)胞,
棄去PBS,放入-70℃ 冰箱保存。   
    3. 組織:采集新鮮組織(注意:生物體死亡后10分鐘內(nèi)取材料并保存好),組織塊以PBS或生理鹽水清洗干凈,
切成小塊,放入-70℃冰箱中保存。   
    樣本量:組織樣本,質(zhì)量大于100mg;細(xì)胞樣本,細(xì)胞數(shù)大于1×106;  
    
◇蛋白質(zhì)抽提:   
    實(shí)驗(yàn)對(duì)象為組織樣品,取適量(250~500mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml含蛋白酶抑制劑的總
蛋白抽提試劑(或核蛋白抽提試劑),勻漿后抽提總蛋白(或核蛋白)。實(shí)驗(yàn)對(duì)象為細(xì)胞樣品(細(xì)胞培養(yǎng)),每
份樣品取1×106~1×107細(xì)胞,PBS清洗細(xì)胞,去PBS加0.1ml~1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑(或核蛋白
抽提試劑)抽提總蛋白(或核蛋白)。標(biāo)本也可交給我們處理,組織標(biāo)本每個(gè)10元,核蛋白或膜蛋白I(細(xì)胞樣本)
每個(gè)30元。   
ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)
◇血清:   
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 
    
◇血漿:   
    應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% 
heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形 
◇細(xì)胞培養(yǎng)上清:   
   檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的 
成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放 
出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。 

 


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