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- 公司名稱 上海劍鈍生物科技有限公司
- 品牌
- 型號 JRD
- 所在地 上海市
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2019/4/3 17:05:13
- 訪問次數(shù) 354
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EMSA探針檢測指標(biāo)有局限,實(shí)驗(yàn)前請電詢;
探針是一小段單鏈DNA或者RNA片段,用于檢測與其互補(bǔ)的核酸序列。探針與樣品雜交時,探針和與其互補(bǔ)的核酸(DNA或RNA)序列通過氫鍵緊密相連,隨后,未被雜交的多余探針被洗去。zui后,根據(jù)探針的種類,可進(jìn)行放射自顯影、熒光顯微鏡、酶聯(lián)放大等方法來判斷樣品中是否,或者何位置含有被測序列
凝膠遷移或電泳遷移率實(shí)驗(yàn)(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一種研究DNA結(jié)合蛋白和其相關(guān)的DNA結(jié)合序列相互作用的技術(shù),可用于定性和定量分析。這一技術(shù)zui初用于研究DNA結(jié)合蛋白,目前已用于研究RNA結(jié)合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。
通常將純化的蛋白和細(xì)胞粗提液和32P同位素標(biāo)記的DNA或RNA探針一同保溫,在非變性的聚丙烯凝膠電泳上,分離復(fù)合物和非結(jié)合的探針。DNA-復(fù)合物或RNA-復(fù)合物比非結(jié)合的探針移動得慢。同位素標(biāo)記的探針依研究的結(jié)合蛋白的不同,可是雙鏈或者是單鏈。當(dāng)檢測 如轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子一類的DNA結(jié)合蛋白,可用純化蛋白,部分純化蛋白,或核細(xì)胞抽提液。在檢測RNA結(jié)合蛋白時,依據(jù)目的RNA結(jié)合蛋白的位置,可用純化或部分純化的蛋白,也可用核或胞質(zhì)細(xì)胞抽提液。競爭實(shí)驗(yàn)中采用含蛋白結(jié)合序列的DNA或RNA片段和寡核苷酸片段(特異), 和其它非相關(guān)的片段(非特異),來確定DNA或RNA結(jié)合蛋白的特異性。在競爭的特異和非特異片段的存在下,依據(jù)復(fù)合物的特點(diǎn)和強(qiáng)度來確定特異結(jié)合。
EMSA組織樣本-80度保存、干冰運(yùn)輸;活細(xì)胞于培養(yǎng)瓶中裝滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸;
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