Human TNF-α ELISA用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗人 TNF-α 單克隆抗體預(yù)包被在高 親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和生物素化的檢測抗體，經(jīng)過孵育，樣本 中存在的 TNF-α 與固相抗體和檢測抗體結(jié)合。

Human TNF-α ELISA試劑準(zhǔn)備:

檢測前請將所有的試劑、樣本恢復(fù)至室溫。 如果濃縮的試劑出現(xiàn)結(jié)晶，37℃溫浴，直至結(jié)晶全部溶解。 1×洗液 吸取 20×濃縮洗液 50 ml 至 1 L 的量筒，加蒸餾水或去離子水至 1000 ml，輕輕混勻，避免泡 沫。 轉(zhuǎn)移至干凈瓶內(nèi)。2 - 25℃貯存，1×洗液可穩(wěn)定 30 天。 1×檢測緩沖液 吸取 10×濃縮檢測緩沖液 5 ml 至 100 ml 量筒，加蒸餾水或去離子水至 50 ml，輕輕混勻，避 免泡沫。 2 - 8℃貯存，1×檢測緩沖液可穩(wěn)定保存 30 天。 檢測抗體 稀釋前充分混勻。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本的數(shù)量，用 1×檢測緩沖液按 1：100 稀釋濃縮的檢 測抗體。 注意：請在 30 分鐘內(nèi)使用稀釋后的檢測抗體。 辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素 稀釋前充分混勻。 根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本的數(shù)量，用 1×檢測緩沖液按 1：100 稀釋濃縮的辣根過氧化物酶標(biāo)記的 鏈霉親和素。注意事項：請在 30 分鐘內(nèi)使用稀釋后的辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素。

Human TNF-α ELISA檢測原理：本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗人 TNF-α 單克隆抗體預(yù)包被在高 親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和生物素化的檢測抗體，經(jīng)過孵育，樣本 中存在的 TNF-α 與固相抗體和檢測抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶標(biāo) 記的鏈霉親和素(streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與 樣本中 TNF-α 的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在 450 nm 波長(參考波長 570 - 630 nm)測定 吸光度值。

Human TNF-α ELISA介紹：TNF-α 對刺激物 (感染因子或組織受損) 產(chǎn)生應(yīng)答后，在全身循環(huán)，激活中性粒細(xì)胞，改變血管內(nèi)皮細(xì)胞的特性， 調(diào)控其它組織的代謝活性，以及通過誘導(dǎo)局部凝血作用展現(xiàn)腫瘤殺傷活性。 TNF-α 在關(guān)節(jié)組織和其它組織發(fā)生炎癥的發(fā)病機(jī)制具有重要作用。 zui近，越來越多的信息表明 TNF-α 也參與了 AIDS 的發(fā)病機(jī)制。TNF-α 的測定對于移植研究也非常有用。

Human TNF-α ELISA靈敏度: 人 TNF-α 的zui低可檢測濃度為 0.42 pg/ml。 10 個零標(biāo)準(zhǔn)品濃度 OD 的平均值加上兩倍 SD，計算zui低可檢測濃度

Human TNF-α ELISA標(biāo)本要求：血清，血漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清