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過表達慢病毒構(gòu)建及包裝實驗外包

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過表達慢病毒產(chǎn)品,將客戶的目的基因CDS序列轉(zhuǎn)接到慢病毒載體上,通過包裝獲得過表達目的基因的慢病毒顆粒;

慢病毒(Lentivirus, LV)屬于逆轉(zhuǎn)錄病毒科,為RNA病毒。經(jīng)過改造的慢病毒作為外源基因載體,具有其*的特點和優(yōu)勢。慢病毒載體作為一種特殊的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體,具有可感染分裂細胞及非分裂細胞、轉(zhuǎn)移基因片段容量較大、目的基因表達時間長、不易誘發(fā)宿主免疫反應(yīng)等優(yōu)點,已成為當(dāng)前基因治療載體研究的熱點。
慢病毒載體有下列優(yōu)點:
(1)*的轉(zhuǎn)染效率:可非常高效地把基因轉(zhuǎn)染到活體模式生物和幾乎所有的哺乳動物細胞中,包括分裂和不分裂的細胞。不分裂細胞處于不活躍或者停止生長的狀態(tài),非常難轉(zhuǎn)染,例如神經(jīng)元細胞、原代細胞、干細胞等,針對這類細胞慢病毒載體的轉(zhuǎn)染效率接近*。
(2)穩(wěn)定*的表達:載體帶有可進行高效率的包裝、轉(zhuǎn)染并穩(wěn)定整合進靶細胞的基因組中的序列元件,目的基因參與細胞的基因重組,形成穩(wěn)定遺傳物質(zhì),使得目的基因在細胞中可穩(wěn)定*表達。
(3)高安全性,低免疫原性:病毒載體自身滅活,無病毒的復(fù)制。上海世翱提供的慢病毒表達載體是自身復(fù)制滅活的,由于細胞不帶有病毒外殼基因,轉(zhuǎn)染后的細胞并不能產(chǎn)生病毒粒子。此外整合進基因組后導(dǎo)致5’-LTR啟動子失活,阻止了慢病毒的復(fù)制。
(4)可調(diào)控表達:可控表達一直是載體研究的一個重要方向,經(jīng)過特定的元件修飾的慢病毒表達載體,可實現(xiàn)只有在特定的外源或內(nèi)源物質(zhì)的作用下才能產(chǎn)生表達,從而調(diào)控目的基因的定時、定量表達。
 
上海劍鈍提供
過表達慢病毒構(gòu)建及包裝實驗外包:各種報告基因(GFP、RFP、mCherry、Luciferase、Egfp-Luciferase等)或標(biāo)簽(FALG、HA、His等)或抗性(Puromycin、Zeocin)的慢病毒,純化后的病毒滴度可以達到 1×108 - 1×1010 TU/ml,可以滿足細胞水平研究所需病毒量和滿足瘤內(nèi)注射需要量不同規(guī)格病毒擴增滴度。技術(shù)服務(wù)包括:過表達慢病毒構(gòu)建與包裝、RNA干擾慢病毒構(gòu)建與包裝、miRNA過表達慢病毒構(gòu)建與包裝、miRNA封閉慢病毒構(gòu)建與包裝。

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