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TL200系列熱釋光測(cè)量系統(tǒng)

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熱釋光測(cè)量?jī)x是研究光合作用的強(qiáng)有力的工具,是研究PSII電子傳輸?shù)挠行结?,廣泛應(yīng)用于除草劑對(duì)PSII的受體效應(yīng)、QA與QB穩(wěn)定性、光合放氧復(fù)合物(OEC)穩(wěn)定性及PSII總體完整性等,還用于光合突變個(gè)體的篩選等。

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    熱釋光測(cè)量?jī)x是研究光合作用的強(qiáng)有力的工具,是研究PSII電子傳輸?shù)挠行结?,廣泛應(yīng)用于除草劑對(duì)PSII的受體效應(yīng)、QA與QB穩(wěn)定性、光合放氧復(fù)合物(OEC)穩(wěn)定性及PSII總體完整性等,還用于光合突變個(gè)體的篩選等。

TL200系列熱釋光測(cè)量?jī)x是針對(duì)研究PSII能量水平結(jié)構(gòu)而設(shè)計(jì)的。PSII反應(yīng)中心光誘導(dǎo)電荷分離導(dǎo)致儲(chǔ)存了吸收光能的激發(fā)電子對(duì)的累積。加熱誘導(dǎo)這些激發(fā)電子對(duì)的重組,從而引發(fā)光釋放,并在一定溫度范圍內(nèi)形成特異性熱釋光曲線。根據(jù)不同釋光曲線的形狀、峰位和峰值,可以研究分析關(guān)于特定激發(fā)電子對(duì)的能量穩(wěn)定性及PSII反應(yīng)中心功能等。TL200系列熱釋光測(cè)量?jī)x的測(cè)量范圍為-90°C到+190°C,使用范圍更寬,可以對(duì)低溫、高溫段熱釋光進(jìn)行研究。
 
 
應(yīng)用領(lǐng)域
1、 光合機(jī)理研究——捕光色素復(fù)合體,PSII反應(yīng)中心,放氧復(fù)合物研究;PSII能級(jí)分析;原初反應(yīng)階段的內(nèi)在過程探測(cè)
2、 植物脅迫生理的早期檢測(cè)與診斷
3、 植物病蟲害相關(guān)研究
4、 除草劑影響
5、 對(duì)植物光合研究的完善補(bǔ)充
 
典型樣品     
植物碎片
各種微藻
葉綠體懸浮液
類囊體懸浮液
 
工作原理
熱釋光(Thermoluminescence,縮寫TL)是晶體受到輻射照射后,會(huì)產(chǎn)生自由電子,這些電子被晶格缺陷俘獲而積攢起來,在加熱過程中以光形式釋放出來。其基本的實(shí)驗(yàn)過程是將葉片快速冷凍到某一溫度,之后給葉片一個(gè)足夠強(qiáng),但時(shí)間盡量短(一般<5µs)的單翻轉(zhuǎn)光(single turn-over ?ash),用于誘導(dǎo)每個(gè)PSII反映中心發(fā)生僅一次的電荷分離;然后逐漸升溫,同時(shí)測(cè)量葉片放出的熱釋光,繪制TL譜帶。
熱釋光研究中的一個(gè)主要工具是單次翻轉(zhuǎn)光閃,要求足夠強(qiáng)(光源強(qiáng)度高達(dá) 150 000 µmol(photons).m2.s1)和足夠短(典型 < 5 微秒)來誘導(dǎo)每一個(gè)PSII反應(yīng)中心發(fā)生一次,且僅一次的電荷分離。光閃的飽和效果可以通過QB段的強(qiáng)度來檢查,它應(yīng)該在*光閃后達(dá)到zui大,在2次光閃后不再增加。當(dāng)前許多實(shí)驗(yàn)中使用的氙燈光閃具有明顯缺陷——一個(gè)長(zhǎng)的持續(xù)發(fā)光,或者“閃光拖尾”,這會(huì)在某些PSII反應(yīng)中心中產(chǎn)生兩次的電荷分離(連擊)。雖然激光閃光能夠有效降低連擊,但不能消除。
TL200系列熱釋光測(cè)量?jī)x使用能量足夠強(qiáng)的LED光源,所釋放5-10µs的方波脈沖能夠飽和所有的PSII反應(yīng)中心,其溫度控制單元可以在降溫后,再使樣品的溫度以0.1℃/sec到 2/sec的速率線性增加。不同的閃光序列及樣品處理能夠使樣品處于不同的能量狀態(tài),不同的溫度下釋放的光能源自光合機(jī)構(gòu)的不同結(jié)構(gòu)。分析釋光曲線的形狀、峰位和峰值,可以研究分析關(guān)于特定激發(fā)電子對(duì)的能量穩(wěn)定性及PSII反應(yīng)中心功能等。
TL200系列熱釋光測(cè)量?jī)x三種型號(hào)的控溫方式與范圍

具體型號(hào)
控溫方式
控溫范圍
TL200/PMT標(biāo)準(zhǔn)版
水冷單元——控溫模塊
-25 ℃ 到+70
TL300/HT高溫版
水冷單元——高溫控制模塊
-25 ℃ 到+190
TL400/LT液氮版
水冷單元——液氮制冷單元——控溫模塊
-90 ℃ 到+70

 
系統(tǒng)組成
TL200系列熱釋光測(cè)量系統(tǒng)由3部分組成:多功能控制單元、溫度調(diào)節(jié)器控制單元及
多功能控制單元(Multipurpose Control Unit根據(jù)用戶定義方案或熱發(fā)光向?qū)峁┑膶?shí)驗(yàn)程序來執(zhí)行實(shí)驗(yàn)過程,有兩個(gè)輸入頻道,一個(gè)用于測(cè)量熱發(fā)光信號(hào)(TL信號(hào)),另一個(gè)用于測(cè)量溫度。 測(cè)量曲線以兩種格式顯示:時(shí)間/溫度和時(shí)間/TL信號(hào),或溫度/TL信號(hào)。
溫度調(diào)節(jié)器控制單元(Thermoregulator Control Unit可以在-90°C 到 +190°C范圍內(nèi)以0.1°C的精確度控制樣品的溫度。 系統(tǒng)前面板可以顯示實(shí)際的溫度,溫度調(diào)節(jié)可以通過手動(dòng)或程序控制(軟件)來實(shí)現(xiàn)。有兩種工作模式:恒溫模式和溫度梯度模式,在恒溫模式下儀器將維持樣品在恒定的溫度,而在溫度梯度模式下,可以使樣品的溫度以0.1°C/sec到 2°C/sec的速率線性變化。
AC-88水冷單元可將系統(tǒng)溫度降低到4°C,包含一個(gè)電子控制的抽水泵和內(nèi)部可以儲(chǔ)水的制冷器,用于降低測(cè)量室的環(huán)境溫度。
CryoFab液氮罐通過管路連接到測(cè)量室,通過電子控制的低溫輸出閥可以將系統(tǒng)溫度控制在 -20°C 到 -90°C。
由TFPE單元控制的輔助加熱模塊可以將系統(tǒng)溫度加熱到+190°C。
測(cè)量室(Measuring Chamber又包括四個(gè)關(guān)鍵組成部分:光源、 光電倍增器、A/D 轉(zhuǎn)換器、具有溫度控制器的樣品盤:
1.         光源由8個(gè)超亮的發(fā)光二極管(λmax=630 nm)組成,發(fā)射的光閃強(qiáng)度高達(dá)150,000 µmol(photons). m2.s1以上,光閃持續(xù)時(shí)間zui長(zhǎng)為150 µs(典型5-10us),光強(qiáng)和光閃持續(xù)時(shí)間通過軟件控制。
2.         光電倍增器可以探測(cè)從300到900nm范圍的光量子,從而測(cè)量熱發(fā)光信號(hào)和緩發(fā)熒光。光電倍增器包括自己的電源。
3.         A/D轉(zhuǎn)換器用于光電倍增器的電流放大、軟件控制增益和數(shù)字化,放大器的時(shí)間反應(yīng)固定在50ms,以確定zui小取樣周期到100ms。
 
技術(shù)參數(shù)
·         溫度范圍:
TL200/PMT標(biāo)準(zhǔn)版:-25 ℃ 到+70
TL 300/HT高溫版:-25 ℃ 到+190
TL 400/LT液氮版:-90 ℃ 到+70
·         控溫模式:恒溫;線性變化(0.1ºC/sec - 2ºC/sec)
·         過熱保護(hù):提供
環(huán)境光保護(hù):提供
·         控制模式:手動(dòng)(恒溫);程序設(shè)定溫度曲線
·         樣品盤:直徑½英寸鍍金銅盤
·         測(cè)量樣品:藻類、藍(lán)細(xì)菌、葉綠體懸浮液,葉片碎片等
·         光源:波長(zhǎng)lmax=625nm,光源強(qiáng)度高達(dá) 150 000 µmol(photons). m2.s1以上
·         探測(cè)系統(tǒng):傳感器為可以通過軟件靈敏控制的光電倍增器,光譜響應(yīng)為300nm-900nm,zui小取樣周期100ms,時(shí)間響應(yīng)50ms,接通延遲100ms
·         控制:用戶可通過語(yǔ)言自定義程序控制儀器測(cè)量過程
·         通訊:USB
·         軟件:FluorWin 3.6
·         電源90V-240V
 
典型應(yīng)用
上圖為源自擬南芥未冷凍葉片的熱釋光(M.Roman ,1998)。實(shí)心符號(hào):對(duì)照(a);空心符號(hào):輕度脫水(b)。單閃(細(xì)線)產(chǎn)生75%S225%S1(只有S2S3產(chǎn)生熱釋光,S1無),雙閃(粗線)25%S275%S3,3閃(點(diǎn)線)25%S3。a、對(duì)照植物。單閃后,熱釋光B段與S2QB-相*(B2,見表1)且可以被單因子擬合得很好。2次閃光后,則需要3個(gè)因子,S2QB-B1),S3QB-B2)和一個(gè)剩余因子(未顯示)。b、適度脫水的植物。B段下調(diào),S3S2在更大程度上表明了類囊體腔內(nèi)一個(gè)暗穩(wěn)態(tài)的酸性pH。45攝氏度段(余輝)源自S2/3QB中心中熱誘導(dǎo)的從基質(zhì)還原劑向QB的電子傳遞,使它們發(fā)光:它的增加表明了一個(gè)強(qiáng)的同化勢(shì)能NADP+ATPDucruet 2003)。
產(chǎn)地:歐洲
 


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