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技術(shù)文章
液相色譜儀在生化方面的應(yīng)用
點(diǎn)擊次數(shù)：230 發(fā)布時(shí)間：2014-12-15
液相色譜儀主要分析方向是分析嘌呤及嘧啶基的核甙或核甙酸及具有相關(guān)的肽和蛋白質(zhì)?！ 、僭诩?xì)胞核中有種類繁多的甙及核甙酸，分別用不同的檢測(cè)器或酶轉(zhuǎn)移檢測(cè)器或利用酶反應(yīng)進(jìn)行定性測(cè)定。用離子交換柱和緩沖游泳梯度淋洗。C18柱用含磷酸的緩沖水溶液的梯度淋洗法均能得到滿意的結(jié)果。 ?、诜治龊怂峤陙?lái)有關(guān)分析核酸的研究相當(dāng)多，主要是分離RNA、DNA及碎片。現(xiàn)在使用硅烷化的硅藻土或長(zhǎng)碳鏈季胺鹽涂漬在上面制成系列填充柱。已能分離t-RNA,r-RNA及DNV碎片。還可利用此技術(shù)做RNA碎片的序列分離制備工具，對(duì)生物研究起了重要的作用。 ③氨基酸、肽、蛋白質(zhì)的分析，氨基酸分析主要是制成熒光衍生物或酰氯的衍生物的測(cè)定其序列。用液相色譜的柱后衍生物法測(cè)定其序列。用四烷基氯化胺肽形成離子對(duì)凝膠色譜測(cè)定蛋白質(zhì)，其分離效果也很好。 ④酶的分析，酶是在血清及其他生理樣品中常有的反應(yīng)產(chǎn)物，利用化學(xué)分析法操作不便，易造成誤差，利用液相色譜技術(shù)分析，具有操作簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確的特點(diǎn)。如測(cè)定堿性或酸性磷酸酶的含量，測(cè)定反應(yīng)產(chǎn)物中腺甙脫 胺酶的含量等，當(dāng)前對(duì)酶用色譜法分離分析的研究工作已開(kāi)展很多?！ 、萏堑姆治?，糖的分析是其它方法較難完成的。如把糖與硼酸緩沖液預(yù)選混合，使生成糖-硼酸絡(luò)合離子，再進(jìn)行分離?？砂颜崛樘恰⒗?、阿蘆糖、山梨糖、果糖、半乳糖、巖藻糖、木糖、葡萄糖等幾十種，全部分開(kāi)。也可用胺基柱分離各種天然產(chǎn)物中伯糖的各繃分。