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液相色譜儀色譜柱3大安裝步驟和使用秘訣大揭密
點(diǎn)擊次數(shù)：377 發(fā)布時間：2014-10-28
液相色譜儀由高壓液體泵、檢測器及液相色譜柱等三部分組成，其中液相色譜柱的正確安裝和使用，是液相色譜工作的關(guān)鍵;也是液相色譜工作者獲得正確可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的必經(jīng)之路。因此，液相色譜柱的安裝和使用都有哪些應(yīng)該注意和理解的呢？
色譜柱的構(gòu)造分別為：柱管、壓帽/卡套、篩板（濾片）、接頭
首先，液相色譜儀中的液相色譜柱的三大安裝步驟：
液相色譜儀中的液相色譜柱安裝*步：
.拆開柱包裝盒，確認(rèn)色譜柱的類型、尺寸、出廠日期以及柱內(nèi)貯存的溶劑。
液相色譜儀中的液相色譜柱安裝第二步：
擰下柱兩端接頭的密封堵頭放回包裝盒供備用。
液相色譜儀中的液相色譜柱安裝第三步：
按柱管上標(biāo)示的流動相流向，將色譜柱的入口端通過連接管與進(jìn)樣閥出口相連接（如條件允許，建議在柱前使用保護(hù)柱）;柱的出口與檢測器連接。連接 管是外徑為1.57mm、內(nèi)徑為0.1-0.3mm的不銹鋼管。連接管的兩端均有空心螺釘及密封用壓環(huán)。在接管時一定要設(shè)法降低柱外死體積。
液相色譜柱的使用應(yīng)該注意的三點(diǎn)：
在色譜柱在使用前，進(jìn)行柱的性能測試，并將結(jié)果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。
樣品的前處理：
使用流動相溶解樣品，使用予處理柱除去樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)，使用0.45μm的過濾膜過濾除去微粒雜質(zhì)。
流動相流速的選擇：
因柱效是柱中流動相線性流速的函數(shù)，使用不同的流速可得到不同的柱效。對于一根特定的色譜柱，要追求*柱效，使用* 流速。對內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱，流速一般選擇1ml/min，對于內(nèi)徑為4.0mm柱，流速0.8ml/min為佳。當(dāng)選用*流速時，分析時間可能 延長。可采用改變流動相的洗滌強(qiáng)度的方法以縮短分析時間（如使用反相柱時，可適當(dāng)增加甲醇或乙腈的含量）。
流動相的配制：
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的，因此要求流動相具備的特點(diǎn)是，流動相對樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會沉淀在柱中（或長時間保留在柱中）；流動相具有一定惰性，與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)（特殊情況除外）；流動相的黏度要盡量小，以便在使用 較長的分析柱時能得到好的分離效果;同時降低柱壓降，延長液體泵的使用壽命（可運(yùn)用提高溫度的方法降低流動相的黏度）；