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島津LC-10AT液相色譜儀使用流程與規(guī)范
點擊次數(shù)：662 發(fā)布時間：2014-11-28
島津LC-10AT液相色譜儀使用流程與規(guī)范
島津LC-10AT液相色譜儀，是一款高性價比高*的HPLC，下文為該款機型的使用流程的規(guī)范：1．目的
規(guī)范島津LC-10AT型液相色譜儀的使用。
2．范圍
適用于島津LC-10AT型液相色譜儀的使用。
3．職責(zé)
質(zhì)檢員對本規(guī)程的實施負(fù)責(zé)。
4．規(guī)程
4.1系統(tǒng)組成：本系統(tǒng)由2個LC-10ATvp溶劑輸送泵（分主/A泵和副/B泵）、Rheodyne7725i手動進(jìn)樣閥、SPD-10Avp紫外-可見檢測器、N2000色譜數(shù)據(jù)工作站和電腦等組成，另外還包括打印機、不間斷電源等輔助設(shè)備。
4.2準(zhǔn)備
4.2.1準(zhǔn)備所需的流動相，用合適的0.45μm濾膜過濾，超聲脫氣20min。
4.2.2根據(jù)待檢樣品的需要更換合適的洗脫柱（注意方向）和定量環(huán)。
4.2.3配制樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液（也可在平衡系統(tǒng)時配制），用合適的0.45μm濾膜過濾。
4.2.4檢查儀器各部件的電源線、數(shù)據(jù)線和輸液管道是否連接正常。
4.3開機：接通電源，依次開啟不間斷電源、B泵、A泵、檢測器，待泵和檢測器自檢結(jié)束后，打開打印機、電腦顯示器、主機，zui后打開色譜工作站。
4.4參數(shù)設(shè)定
4.4.1波長設(shè)定：在檢測器顯示初始屏幕時，按[func]鍵，用數(shù)字鍵輸入所需波長值，按[Enter]鍵確認(rèn)。按[CE]鍵退出到初始屏幕。
4.4.2流速設(shè)定：在A泵顯示初始屏幕時，按[func]鍵，用數(shù)字鍵輸入所需的流速（柱在線時流速一般不超過1ml/min），按[Enter]鍵確認(rèn)。按[CE]鍵退出。
4.4.3流動相比例設(shè)定：在A泵顯示初始屏幕時，按[conc]鍵，用數(shù)字鍵輸入流動相B的濃度百分?jǐn)?shù)，按[Enter]鍵確認(rèn)。按[CE]鍵退出。
4.4.4梯度設(shè)定
4.4.4.1在A泵顯示初始屏幕時，按[edit]鍵，[Enter]鍵；
4.4.4.2用數(shù)字鍵輸入時間，按[Enter]鍵，重復(fù)按[func]鍵選擇所需功能（FLOW設(shè)定流速，BCNC設(shè)定流動相B的濃度），按[Enter]鍵，用數(shù)字鍵輸入設(shè)定值，按[Enter]鍵；
4.4.4.3重復(fù)上一步設(shè)定其它時間步驟；
4.4.4.4用數(shù)字鍵輸入停止時間，重復(fù)按[func]鍵直至屏幕顯示STOP，按[Enter]鍵。按[CE]鍵退出。
4.5更換流動相并排氣泡
4.5.1將A/B管路的吸濾器放入裝有準(zhǔn)備好的流動相的儲液瓶中；
4.5.2逆時針轉(zhuǎn)動A/B泵的排液閥180°，打開排液閥；
4.5.3按A/B泵的[purge]鍵，pump指示燈亮，泵大約以9.9ml/min的流速沖洗，3min（可設(shè)定）后自動停止；
4.5.4將排液閥順時針旋轉(zhuǎn)到底，關(guān)閉排液閥。
4.5.5如管路中仍有氣泡，則重復(fù)以上操作直至氣泡排盡。
4.5.6如按以上方法不能排盡氣泡，從柱入口處拆下連接管，放入廢液瓶中，設(shè)流速為5ml/min，按[pump]鍵，沖洗3min后再按[pump]鍵停泵，重新接上柱并將流速重設(shè)為規(guī)定值。
4.6平衡系統(tǒng)
4.6.1按《N2000色譜數(shù)據(jù)工作站操作規(guī)程》打開“在線色譜工作站”軟件，輸入實驗信息并設(shè)定各項方法參數(shù)后，按下“數(shù)據(jù)收集”頁的[查看基線]按鈕。
4.6.2等度洗脫方式
4.6.2.1按A泵的[pump]鍵，A、B泵將同時啟動，pump指示燈亮。用檢驗方法規(guī)定的流動相沖洗系統(tǒng)，一般zui少需6倍柱體積的流動相。
4.6.2.2檢查各管路連接處是否漏液，如漏液應(yīng)予以排除。
4.6.2.3觀察泵控制屏幕上的壓力值，壓力波動應(yīng)不超過1MPa。如超過則可初步判斷為柱前管路仍有氣泡，按4.5.6操作。
4.6.2.4觀察基線變化。如果沖洗至基線漂移<0.01mV/min，噪聲為<0.001mV時，可認(rèn)為系統(tǒng)已達(dá)到平衡狀態(tài)，可以進(jìn)樣。
4.6.3梯度洗脫方式
4.6.3.1以檢驗方法規(guī)定的梯度初始條件，按4.6.2項下方法平衡系統(tǒng)。
4.6.3.2在進(jìn)樣前運行1~2次空白梯度。方法：按A泵的[run]鍵，prog.run指示燈亮，梯度程序運行；程序停止時，prog.run指示燈滅。
4.7進(jìn)樣
4.7.1進(jìn)樣前按檢測器[zero]鍵調(diào)零，按軟件中[零點校正]按鈕校正基線零點，再按一下[查看基線]按鈕使其彈起。
4.7.2用試樣溶液清洗注射器，并排除氣泡后抽取適量。