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哺乳動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)上清液的LC/MS/MS同時(shí)分析

閱讀:267      發(fā)布時(shí)間:2016-12-15
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  生產(chǎn)生物燃料或生物制藥的工業(yè)發(fā)酵需要常規(guī)監(jiān)測(cè)介質(zhì)條件, 如 pH、溶解氣體、碳源(葡萄糖)和氮源(谷氨酰胺)等,從而優(yōu)化及控制發(fā)酵過(guò)程。然而除上述因素外,培養(yǎng)基中還包含其他一些重要生物成分如維生素、核酸和其他主要代謝物,如果一起監(jiān)控,可以得到更多有關(guān)生物過(guò)程技術(shù)的詳細(xì)信息。為滿足全面分析培養(yǎng)基成分的需求,我們優(yōu)化了分析條件,開(kāi)發(fā)出“細(xì)胞培養(yǎng)分析方法包”,該方法包可以監(jiān)控下面列出的95種化合物的相對(duì)豐度。使用這個(gè)方法包,我們研究在雜交癌細(xì)胞一周期5天內(nèi)生長(zhǎng)過(guò)程中培養(yǎng)基成分的豐度變化。
  
  結(jié)果表明,主要的碳源和氮源即葡萄糖、谷氨酰胺以及幾種氨基酸隨著細(xì)胞生長(zhǎng)信號(hào)強(qiáng)度逐漸減弱。因?yàn)橄钠咸烟?,所以分泌的代謝物乳酸隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)信號(hào)逐漸增強(qiáng)。觀察其他幾種化合物也表現(xiàn)為類(lèi)似模式的增強(qiáng)。必需氨基酸和幾種維生素的強(qiáng)度并不隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而發(fā)生變化。

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