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CRM-GTX5-d 魚腥藻毒素-5的制備

從大規(guī)模實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的亞歷山大藻(Alexandriumtamarense)中分離得到N-硫代氨基甲酰-弓形毒素-3(C2)，經(jīng)化學(xué)轉(zhuǎn)化為GTX5，然后經(jīng)幾個(gè)色譜步驟[4]純化。用LC-MS/MS[5，6](圖1和2)和1 HNMR確證了GTX5的結(jié)構(gòu)和純度。用LC-高分辨質(zhì)譜(LC-高分辨質(zhì)譜)對GTX5的[M+H]*離子進(jìn)行了測定，得到了準(zhǔn)確的m/Zof 380.0984(C_1oH₁₈N₇-O₇S₁^＋為△=0.2ppm)。用LC-MS、LC-OX-FLD[7](圖3)、毛細(xì)管電泳(CE-UV)[8]和化學(xué)發(fā)光氮檢測液相色譜(LC-CLND)進(jìn)一步測定純度[9J]。

用1 HNMR(QNMR)[10]將純化的GTX5在H，0中稀釋，制得原液。在用醋酸調(diào)節(jié)至pH 5的脫氣去離子水中，用準(zhǔn)確稀釋的方法制備了CRM-GTX5-d溶液，并在氬焰琥珀玻璃安瓿中進(jìn)行清洗，并立即進(jìn)行火焰密封。每個(gè)安瓿含有大約0.5毫升的溶液。

分析方法與價(jià)值分配

CRM-GTX5-d(表1)的認(rèn)證值是基于NRC使用三種分析方法得到的結(jié)果：用鄰苯二甲酸氫鉀(NIST SRM 84L)進(jìn)行校準(zhǔn)的qNMR和使用NRC CRM-GTX5-c校準(zhǔn)的LC-CLND和LC-OX-FLD。

同質(zhì)性

從填充系列中選取具有代表性的CRM-GTX5-d安瓿，用LC-ox-FLD法測定GTX5的響應(yīng)。無異質(zhì)性。

穩(wěn)定度

對CRM-GTX5-c進(jìn)行了為期一年的穩(wěn)定性研究，結(jié)果表明，在-12℃或更低的溫度下，GTX5在密封安瓿中具有良好的穩(wěn)定性。

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