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CRM-GTX1&4-e 魚腥草毒素-1和-4溶液材料研制說(shuō)明

閱讀:426      發(fā)布時(shí)間:2022-9-22
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CRM-GTX1&4-e 魚腥草毒素-1和-4的制備

用制備的標(biāo)度層析法從培養(yǎng)的亞歷山大藻中分離到Gonyau毒素-1和-4(GTX184),經(jīng)LC-MS/MS[5,6](圖1和2)和1 HNMR確證其結(jié)構(gòu)和純度。用LC-高分辨質(zhì)譜(LC-HRMS)測(cè)定了GTX1和GTX4的[M+H]*離子,其測(cè)量精度m/z為412.0873(4=2 ppm)。用LC-ox-FLD[7](圖3)、毛細(xì)管電泳-紫外檢測(cè)(CE-JVD)[8]和化學(xué)發(fā)光氮檢測(cè)液相色譜(LC-CLND)[9]進(jìn)一步測(cè)定純度。

純化的GTX1&4在真空下干燥,溶于過(guò)濾、0.5mm HCl水溶液中,經(jīng)1 HNMR(QNMR)[10]定量,經(jīng)過(guò)濾(0.2 Pm)準(zhǔn)確稀釋,pH 3.5時(shí)脫氣0.5mm HCl,制得Crm-GTX184-e溶液,用氬填充琥珀玻璃安瓿,并立即火焰封閉,Eachampoule約含0.5 mL溶液。


分析方法與價(jià)值分配

CRM-GTX1&4-e(表1)的標(biāo)準(zhǔn)值基于NRC使用兩種分析方法得到的結(jié)果:用鄰苯二甲酸氫鉀(NIST SRM 84L)進(jìn)行校準(zhǔn)的qNMR和使用NRC CRM-GTX1&4-d進(jìn)行校準(zhǔn)的LC-MSIMS。

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低水平的弓形蟲毒素-2和-3(GTX2&3)和去arbamoyigonyau毒素-1和-4(DcGTX184)-4(DcGTX184)由LC-MS使用NRC CRMS分配信息值(表2)。

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同質(zhì)性

采用LC-MS/MS方法,從各充填系列中篩選出具有代表性的CRM-GTX184-e安瓿,觀察到GTX1和GTX4的響應(yīng),無(wú)異質(zhì)性。


穩(wěn)定度

穩(wěn)定性研究表明,CRM-GTX1&4-e在+4~C溫度下,在密封安瓿中貯存的鹽酸中GTX1和GTX4具有良好的穩(wěn)定性。

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