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國產(chǎn)分光光度計在波長準(zhǔn)確度和重復(fù)性、雜散光，光度準(zhǔn)確性和重復(fù)性，吸光度范圍，基線穩(wěn)定性等重要指標(biāo)上與進(jìn)口光度計相比有較大的差距，進(jìn)口產(chǎn)品的波長范圍還可以擴(kuò)展到近紅外（大紫外）。

 

由于國產(chǎn)品在測量數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確度和重現(xiàn)性，以及測量范圍、可擴(kuò)展附件等方面的不足，一些測試工作需要使用進(jìn)口分光光度計。

 

一般教學(xué)用途及要求的，建議使用國內(nèi)分光光度計；科學(xué)研究等特殊要求的，建議采購進(jìn)口分光光度計。

 

 

分光光度計，又稱光譜儀(spectrometer)，是將成分復(fù)雜的光，分解為光譜線的科學(xué)儀器。主要用于進(jìn)行以下定性定量分析：檢定物質(zhì)、與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照、比較吸收波長吸收系數(shù)的一致性、純度檢驗、推測化合物的分子結(jié)構(gòu)、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定

 

分光光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源，通過系列分光裝置，從而產(chǎn)生特定波長的光源，光線透過測試的樣品后，部分光線被吸收，計算樣品的吸光值，從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。

單色光輻射穿過被測物質(zhì)溶液時，被該物質(zhì)吸收的量與該物質(zhì)的濃度和液層的厚度（光路長度）成正比，其關(guān)系如下式：

A=-lg(I/I0)=-lgT=kLc

式中 :A 為吸光度；

I0為入射的單色光強(qiáng)度；

I 為透射的單色光強(qiáng)度；

T 為物質(zhì)的透射率；

k 為摩爾吸收系數(shù)；

L 為被分析物質(zhì)的光程，即比色皿的邊長；

c 為物質(zhì)的濃度；

物質(zhì)對光的選擇性吸收波長，以及相應(yīng)的吸收系數(shù)是該物質(zhì)的物理常數(shù)。當(dāng)已知某純物質(zhì)在一定條件下的吸收系數(shù)后可用同樣條件將該供試品配成溶液，測定其吸收度,即可由上式計算出供試品中該物質(zhì)的含量。在可見光區(qū)，除某些物質(zhì)對光有吸收外，很多物質(zhì)本身并沒有吸收但可在一定條件下加入顯色試劑或經(jīng)過處理使其顯色后再測定,故又稱比色分析。由于顯色時影響呈色深淺的因素較多，且常使用單色光純度較差的儀器，故測定時應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)品或?qū)φ掌吠瑫r操作。

 

分光光度計是一種分析測量光譜的儀器，因為需求的不同，分光光度計有著不同的種類，比如可見分光光度計、紫外可見分光光度計、紅外分光光度計、熒光分光光度計和原子吸收分光光度計等等，下面為大家介紹幾種常見的分光光度計種類區(qū)別是什么。

幾種常見的分光光度計種類區(qū)別是什么

      用來測量待測物質(zhì)對可見光(400～760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器，稱為可見分光光度計?？稍?00nm測定細(xì)菌細(xì)胞密度。  

      紫外可見光譜儀用來測量待測物質(zhì)對可見光或紫外光(200～760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器?？梢詼y定核酸和蛋白的濃度，也可以測定細(xì)菌細(xì)胞密度。 

      紫外分光光度計又可分為單光束,假雙光束,雙光束。它們的用途又有區(qū)別。 

      單光束：適于在給定波長處測量吸光度或透光度，一般不能作全波段光譜掃描，要求光源和檢測器具有很高的穩(wěn)定性。 

      雙光束：自動記錄，快速全波段掃描。可消除光源不穩(wěn)定、檢測器靈敏度變化等因素的影響，特別適合于結(jié)構(gòu)分析。儀器復(fù)雜，價格較高。 

      假雙光束也就是比例雙光束，它的原理是由同一單色器發(fā)出的光被分成兩束，一束直接到達(dá)檢測器，另一束通過樣品后到達(dá)另一個檢測器。這種儀器的優(yōu)點是可以監(jiān)測光源變化帶來的誤差，但是并不能消除參比造成的影響。 

      一般的紅外光譜是指大于760nm的紅外光譜，這是研究有機(jī)化合物的光譜區(qū)域，能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣。 

      紅外光譜法的特點是：快速、樣品量少(幾微克-幾毫克)，特征性強(qiáng)(各種物質(zhì)有其特定的紅外光譜圖)、能分析各種狀態(tài)(氣、液、固)的試樣以及不破壞樣品。 

      熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。應(yīng)用于科研、化工、醫(yī)藥、生化、環(huán)保以及臨床檢驗、食品檢驗、教學(xué)實驗等領(lǐng)域。 

      通過對這些參數(shù)的測定, 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。 

      該法主要適用樣品中微量及痕量組分分析常規(guī)儀器之一。是材料分析及質(zhì)量控制部門進(jìn)行常量、微量金屬(半金屬)元素分析的有力工具。 

 

分光光度計已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸，蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量。

儀器主要由光源、單色器、樣品室、檢測器、信號處理器和顯示與存儲系統(tǒng)組成。

 

1.接通電源，打開儀器開關(guān)，掀開樣品室暗箱蓋，預(yù)熱10分鐘。

2.將靈敏度開關(guān)調(diào)至“1”檔（若零點調(diào)節(jié)器調(diào)不到“0”時，需選用較高檔。）

3.根據(jù)所需波長轉(zhuǎn)動波長選擇鈕。

4.將空白液及測定液分別倒入比色杯3/4處，用擦鏡紙擦清外壁，放入樣品室內(nèi)，使空白管對準(zhǔn)光路。

5.在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調(diào)節(jié)零點調(diào)節(jié)器，使讀數(shù)盤指針指向t=0處。

6.蓋上暗箱蓋，調(diào)節(jié)“100”調(diào)節(jié)器，使空白管的t=100，指針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿，分別讀出測定管的光密度值，并記錄。

7.比色完畢，關(guān)上電源，取出比色皿洗凈，樣品室用軟布或軟紙擦凈。

1．該儀器應(yīng)放在干燥的房間內(nèi)，使用時放置在堅固平穩(wěn)的工作臺上，室內(nèi)照明不宜太強(qiáng)。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風(fēng)，防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。

2．使用本儀器前，使用者應(yīng)該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理，以及各個操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前，應(yīng)該對儀器的安全性能進(jìn)行檢查，電源接線應(yīng)牢固，通電也要良好，各個調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確，然后再按通電源開關(guān)。

3．在儀器尚未接通電源時，電表指針必須于“0”刻線上，若不是這種情況，則可以用電表上的校正螺絲進(jìn)行調(diào)節(jié)。