薄層掃描儀是可以對斑點進行掃描的分光光度計，用可見光或紫外光作光源，線性掃描或鋸齒掃描薄層板展開后的斑點，該斑點就吸收該組分特征波長的單色光，剩余的單色光經(jīng)透射或反射或發(fā)射熒光，由檢測器積分起來，獲得這塊斑點面積的待測物質(zhì)含量。
原理
薄層色譜又叫薄板層析，是色譜法中的一種，是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實驗技術(shù)，屬固—液吸附色譜。它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點，一方面適用于少量樣品(幾到幾微克，甚至0.01微克)的分離;另一方面在制作薄層板時，把吸附層加厚加大，因此，又可用來精制樣品，此法特別適用于揮發(fā)性較小或較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的質(zhì)。此外，薄層色譜法還可用來跟蹤有機反應(yīng)及進行柱色譜之前的一種“預(yù)試”。
薄層色譜(Thin Layer Chromatography)常用TLC表示，又稱薄層層析，屬于固-液吸附色譜。是近年來發(fā)展起來的一種微量、快速而簡單的色譜法，它兼?zhèn)淞酥V和紙色譜的優(yōu)點。一方面適用于小量樣品(幾到幾十微克，甚至0.01μg)的分離;另一方面若在制作薄層板時，把吸附層加厚，將樣品點成一條線，則可分離多達500mg的樣品。因此又可用來精制樣品。故此法特別適用于揮發(fā)性較小或在較高溫度易發(fā)生變化而不能用氣相色譜分析的物資。此外，在進行化學反應(yīng)時，常利用薄層色譜觀察原料斑點的逐步消失來判斷反應(yīng)是否完成。
薄層色譜是在被洗滌干凈的玻板(10×3cm左右)上均勻的涂一層吸附劑或支持劑，帶干燥、活化后將樣品溶液用管口平整的毛細管滴加于離薄層板一端約1cm處的起點線上，涼干或吹干后置薄層板于盛有展開劑的展開槽內(nèi)，浸入深度為0.5cm。待展開劑前沿離頂端約1cm附近時，將色譜板取出，干燥后噴以顯色劑，或在紫外燈下顯色。
薄層色譜儀包括：薄層層板點樣器、手動涂布臺、干燥儲備箱、洗板架、紫外光探測器。可以快速分離脂肪酸、類固醇、氨基酸、核苷酸、生物堿及其他多種物質(zhì)。
類別
1.離心薄層色譜儀 2.棒狀薄層色譜儀 3.手動薄層色譜儀 4.雙波長薄層色譜掃描儀 5.全自動薄層色譜儀 6.旋轉(zhuǎn)薄層色譜儀 7.全波長薄層色譜儀 8.型薄層色譜儀 9.二極管陣列薄層色譜掃描儀 10.加壓薄層色譜儀 11.暗箱式薄層色譜攝影儀
用途
適用于化學、化工、醫(yī)藥、臨床、農(nóng)業(yè)、食品、毒理等領(lǐng)域內(nèi)的各種化合物的分離、精制、定性鑒別、雜質(zhì)檢查和含量測定。
操作方法
(1) 薄層板制備 除另有規(guī)定外,將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合,
去除表面的氣泡后，倒入涂布器中,在玻板上平穩(wěn)地移動涂布器進行涂布(厚度為0.2～
0.3mm)，取下涂好薄層的玻板，置水平臺上于室溫下晾干，后在110℃烘30分鐘，即置
有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過透射光和反射光檢視)。
(2) 點樣 除另有規(guī)定外，用點樣器點樣于薄層板上，一般為圓點，點樣基線距底
邊2.0cm，樣點直徑及點間距離同紙色譜法,點間距離可視斑點擴散情況以不影響檢出為
宜。點樣時必須注意勿損傷薄層表面。
(3) 展開 展開缸如需預(yù)先用展開劑飽和，可在缸中加入足夠量的展開劑，并在壁
上貼二條與缸一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑中，密封缸頂?shù)纳w，使系統(tǒng)平衡或
按正文規(guī)定操作。
將點好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中,浸入展開劑的深度為距薄層板底邊0.5
～1.0cm(切勿將樣點浸入展開劑中),密封缸蓋,待展開至規(guī)定距離(一般為10～15cm),
取出薄層板，晾干，按各品種項下的規(guī)定檢測。
(4) 如需用薄層掃描儀對色譜斑點作掃描檢出，或直接在薄層上對色譜斑點作掃描
定量，則可用薄層掃描法。
薄層掃描的方法，除另有規(guī)定外，可根據(jù)各種薄層掃描儀的結(jié)構(gòu)特點及使用說明，
結(jié)合具體情況，選擇吸收法或熒光法，用雙波長或單波長掃描。由于影響薄層掃描結(jié)果
的因素很多，故應(yīng)在保證供試品的斑點在一定濃度范圍內(nèi)呈線性的情況下，將供試品與
對照品在同一塊薄層上展開后掃描，進行比較并計算定量，以減少誤差。各種供試品，
只有得到分離度和重現(xiàn)性好的薄層色譜，才能獲得滿意的結(jié)果。
洗脫后測定法
薄層經(jīng)展開后用刮刀或捕集器將斑點的吸附劑捕集后，再用適當有機溶劑洗脫，然后用可見、紫外分光光度法、熒光分光光度法測定含量。
但樣品斑點不能噴顯色劑，以免影響不測定，斑點位置的確定方法。
樣品在紫外線下發(fā)射熒光的，可在紫外燈下觀察斑點并用針劃去斑點位置。
用碘蒸汽顯色，在組分處理出棕色斑點(碘吸附后會揮發(fā))。
用標準物對照，將標準點于邊上一測顯色時，蓋住樣品，定出斑點位置。
