1.化凍
將血清(Fetal Bovine Serum,Hyclone)從- 20℃冰箱取出,放于4℃冰箱化凍過夜;也可室溫(或浸于自來水中)化凍,化凍后若不馬上滅活,可以放入4℃冰箱暫時保存;
2.滅活
(1) 放入室溫的水浴鍋內開始加熱(同時放入一個內裝200 ml自來水的血清瓶,插入一根溫度計,溫度監(jiān)控以此為準);
(2) 當溫度計顯示56℃時,控制在此溫度30分鐘±3分鐘;若不小心使溫度上升超過56℃,則:若仍未超過60℃,且時間很短(比如:不超過5分鐘),則仍可使用;若超過60℃,或者時間較長,則棄去不用,或者嘗試用于ME細胞的培養(yǎng); (2) 取出,自然冷卻至室溫(約需1-3小時),可分裝或-20℃繼續(xù)凍存;
3.分裝
(1)轉入細胞間,用移液器將血清分裝,注意預先要將血清輕輕搖動數(shù)周、混勻;吹出血清時要注意:不要吹出氣泡(血清很粘稠,很容易產生氣泡;如果已產生氣泡,則在酒精燈火焰上過一下);標好批號和日期;
(2)放入-20℃冰箱凍存(分裝一次大約可以使用1—2個月)。
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