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檢驗(yàn)鏈球菌

閱讀:739      發(fā)布時間:2019-6-12
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      鏈球菌呈球形或橢圓形,直徑0.6-1.0μm,呈鏈狀排列,長短不一,從4-8個至20-30個菌細(xì)胞組成不等,鏈的長短與細(xì)菌的種類及生長環(huán)境有關(guān)。在液體培養(yǎng)基中易呈長鏈,固體培養(yǎng)基中常呈短鏈,由于鏈球菌能產(chǎn)生脫鏈酶,所以正常情況下鏈球菌的鏈不能無限制的延長。多數(shù)菌株在血清肉湯中培養(yǎng)2-4h易形成透明質(zhì)酸的莢膜,繼續(xù)培養(yǎng)后消失。該菌不形成芽胞,無鞭毛,易被普通的堿性染料著色,革蘭氏陽性,老齡培養(yǎng)或被中性粒細(xì)胞吞噬后,轉(zhuǎn)為革蘭氏陰性。

  1、樣品處理:取25g固體(或25mL液體)檢樣加入225mL滅菌生理鹽水,制成混懸液。

  2、吸取5mL混懸液接種至50mL葡萄糖肉浸液肉湯,或直接劃線于血平板(如檢樣污染嚴(yán)重,可同時接種5mL至匹克氏肉湯),36℃生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,接種血平板,36℃生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,挑起乙型溶血圓形突起的細(xì)小菌落,在血平板上分純,觀察在液體和固體中的培養(yǎng)特征、溶血情況及革蘭氏染色、形態(tài),并進(jìn)行鏈激酶試驗(yàn)和桿菌肽敏感試驗(yàn)。

  3、鏈激酶試驗(yàn):吸取草酸鉀血漿0.2mL,加0.8mL滅菌生理鹽水,混勻,再加入鏈球菌18-24h36℃肉浸液肉湯培養(yǎng)物0.5mL及0.25%氯化鈣0.25mL,混勻,置于36℃水浴鍋中水浴10min,血漿混合物自行凝固,觀察凝塊重新*溶解的時間,*溶解為陽性,如24h后不溶解即為陰性。同時用肉浸液肉湯做陰性對照,用已知的鏈激酶陽性的菌株做陽性對照。

  4、桿菌肽敏感試驗(yàn):取典型菌落的菌液涂布于血平板上,用滅菌鑷子夾取每片含有0.04單位的桿菌肽紙片置于上述平板上,36℃培養(yǎng)18-24h,如有抑菌圈出現(xiàn)即為陽性。用已知的陽性菌株做對照。

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