液體培養(yǎng)法是利用液體培養(yǎng)基對(duì)微生物進(jìn)行培養(yǎng)的方法,可分為靜止培養(yǎng)法和深層培養(yǎng)法。
(一)靜止培養(yǎng)法
靜止培養(yǎng)法是指在接種后培養(yǎng)液靜止不動(dòng)進(jìn)行培養(yǎng)。一般包括試管法和三角瓶淺層培養(yǎng)法,培養(yǎng)時(shí)盛液體培養(yǎng)基的螺口瓶或螺口試管的蓋不要擰緊,松散蓋上即可,放于試管架上,然后放置于培養(yǎng)箱或水浴鍋中進(jìn)行培養(yǎng)。在靜置狀態(tài)下,三角瓶?jī)?nèi)的通氣狀況與其中的裝液量和瓶口棉塞的通氣程度對(duì)瓶?jī)?nèi)微生物的生長(zhǎng)速度和生長(zhǎng)量有很大的關(guān)系。一般情況下,接種量越大,培養(yǎng)時(shí)間越長(zhǎng),生長(zhǎng)量越高。剛接種的時(shí)候,菌體需適應(yīng)培養(yǎng)基環(huán)境,故繁殖較慢,然后進(jìn)入快速生長(zhǎng)期,生長(zhǎng)速度呈指數(shù)增長(zhǎng),到一定數(shù)量后,培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分消耗殆盡,次生產(chǎn)物增多,菌體生長(zhǎng)速度減緩。
(二)通氣深層培養(yǎng)法
1.振蕩(搖瓶)培養(yǎng)法
此法早是荷蘭人A. J. Kluyver等在1933年使用,即將三角瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液用8層紗布包住瓶口,以取代一般的棉花塞,同時(shí)降低瓶?jī)?nèi)的裝液量,把它放置于恒溫?fù)u床上有節(jié)奏的振蕩,以該法提高液體溶氧量的目的。
該法可以對(duì)微生物進(jìn)行通氣深層培養(yǎng),通過對(duì)細(xì)菌、酵母等單細(xì)胞微生物振蕩培養(yǎng),可以得到均一的菌懸液,常用于菌種的選育及生化試驗(yàn)和發(fā)酵試驗(yàn)等。
振蕩培養(yǎng)的設(shè)備有恒溫?fù)u床、搖瓶機(jī)等,培養(yǎng)瓶放在里面后,進(jìn)行振蕩培養(yǎng),瓶口用6層~8層的紗布包扎,瓶?jī)?nèi)液體不宜過多,防止濺到瓶塞上引起污染。
2.發(fā)酵罐培養(yǎng)法
可進(jìn)行較大液體量的通氣培養(yǎng),有小型發(fā)酵罐和大型的發(fā)酵罐,小型的發(fā)酵罐一般為1L~100 L,大型的容量一般在1m3-500 m3,能夠提供培養(yǎng)微生物的營(yíng)養(yǎng)和氧氣,并且有自動(dòng)控制和記錄裝置。
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