電泳儀工作原理分類
工作原理
在溶液中能吸附帶電質點或本身帶有可解離基團的物質顆粒,如蛋白質、氨基酸等,在一定的pH值條件下,于直流電場中必然會受到電性相反的電極吸引而發(fā)生移動。不同物質的顆粒在電場中的移動速度除與其帶電狀態(tài)和電場強度有關外,還與顆粒的大小、形狀和介質黏度有關。根據(jù)這一特征,應用電泳法便可以對不同物質進行定性或定量分析,或將一定混合物進行組分分析或單個組分提取制備,電泳儀正是基于上述原理設計制造的。
電泳的影響因素很多,主要有被分離物質的帶電荷量多少、電場強度、緩沖液的pH值和離子強度及支持介質的化學惰性
分類
根據(jù)電泳中是否使用支持介質分為自由電泳和區(qū)帶電泳。
自由電泳不使用支持介質,電泳在溶液中進行。這類電泳又分為非自由界面電泳和自由界面電泳兩類。非自由界面電泳指懸浮在溶液中的帶電粒子(如各種細胞)通電后全部移動,不出現(xiàn)界面,如顯微電泳等。自由界面電泳中被分離物質集中在某一層,形成各自的界面而進行定性或定量分析。自由界面電泳需要昂貴精密的電流儀器,僅在少數(shù)特殊電泳如等電聚焦電泳和等速電泳中使用。
區(qū)帶電泳都使用支持介質,根據(jù)支持介質不同分為濾紙電泳、醋纖膜電泳、薄層電泳和凝膠電泳等。此外,根據(jù)支持介質的裝置形式不同又可分為水平板式電泳、垂直板式電泳、垂直盤狀電泳、毛細管電脈、橋形電泳和連續(xù)流動電泳等。
常見的幾種電泳儀有:
1. 全自動熒光/可見光雙系統(tǒng)電泳儀
具有熒光/可見光雙系統(tǒng),使用熒光試劑項目如CK、LD同工酶。優(yōu)點靈敏度、準確度高且采用高壓、低溫系統(tǒng),速度非???。
2. 全自動醋纖膜電泳儀
為可見光單系統(tǒng),使用醋纖膜電泳片,優(yōu)點為自動化程度更高。多用于臨床常規(guī)血清蛋白電泳分析。
3. 全自動瓊脂糖電泳儀
為可見光單系統(tǒng),使用瓊脂糖凝膠電泳膠片,優(yōu)點為靈敏度高,可用于低濃度蛋白檢驗,如尿蛋白及腦脊液蛋白,同工酶的分離效果也相當不錯,所能做項目較多且靈敏度較高。
4. 全自動電泳分析系統(tǒng)
該電泳儀集中了上述儀器的優(yōu)點,自動點樣、電泳、呈色(或染色、脫色)、烘干??捎酶鞣N電泳片,包括瓊脂片、醋酸片、聚丙烯酰胺等,采用可見光及熒光呈色雙系統(tǒng),是一種較理想的電泳儀。
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